Question

2．繼哺乳動物乳腺生物反應器研發(fā)成功后，膀胱生物反應器的研究也取得了一定進展．最近，科學家培育出一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成入的生長激素并分泌到尿液中．請回答：
（1）獲得轉基因小鼠的核心步驟是基因表達載體的構建．
（2）將人的生長激素基因導入小鼠受體細胞，常用的方法是顯微注射．常用的受體細胞是受精卵，原因是受精卵具有全能性．
（3）通常采用DNA分子雜交技術檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組．
（4）在研制膀胱生物反應器時，應使外源基因在小鼠的膀胱上皮細胞中特異表達．

Answer 1

分析 1、基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．其中常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點； ②要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選③能在宿主細胞中穩(wěn)定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．
2、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．

解答 解：（1）獲得轉基因小鼠的核心步驟是構建基因表達載體，此過程需要用同一種限制酶切割目的基因和運載體，使它們露出相同的末端，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體．
（2）顯微注射法是將目的基因導入受體細胞最有效的方法．由于受精卵（或早期胚胎細胞）具有全能性，可使外源基因在相應組織細胞表達，因此進行基因轉移時，通常要將外源基因轉入受精卵（或早期胚胎）中．
（3）檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組通常采用DNA分子雜交技術．
（4）在研制膀胱生物反應器時，應在目的基因前加入膀胱組織特異性表達的啟動子，使外源基因在小鼠的膀胱上皮細胞中特異表達．
故答案為：
（1）基因表達載體的構建
（2）顯微注射   受精卵   受精卵具有全能性
（3）DNA分子雜交
（4）膀胱上皮

點評 本題綜合考查基因工程技術的有關知識，要求考生識記基因工程的原理、使用工具、操作步驟及應用，難度適中．