Question

12．圖是基因工程中利用pBR322質(zhì)粒（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因）與抗病基因構(gòu)建重組質(zhì)粒的示意圖，該質(zhì)粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見下表．結(jié)合圖表分析，下列敘述錯(cuò)誤的是（　�。�

限制性核酸內(nèi)切酶	ApaⅠ	EcoRⅠ	PstⅠ	Smal
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)	↓ AGCT TCGA ↑	↓ GAATTC CTTAAG ↑	↓ CTGCAG GACGTC ↑	↓ CCCGGG GGGCCC ↑

• A． pBR322質(zhì)粒、抗病基因和重組質(zhì)粒的基本組成單位都是脫氧核苷酸
• B． 形成重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用限制性核酸內(nèi)切酶PstⅠ和EcoRⅠ對(duì)含抗病基因的DNA、質(zhì)粒進(jìn)行切割
• C． 一個(gè)質(zhì)粒被限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同時(shí)切割后可得到3個(gè)DNA片段和6個(gè)黏性末端
• D． 將受體細(xì)胞置于含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可篩選出已導(dǎo)入抗病基因的受體細(xì)胞

Answer 1

分析 分析題圖：質(zhì)粒和外源DNA分子都含有三種限制酶切點(diǎn)，即限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ，其中Sma I切割位點(diǎn)在目的基因上，所以不能用該酶切割外源DNA了．用PstⅠ和EcoRⅠ酶切質(zhì)粒切成兩個(gè)片段，用PstⅠ和EcoRⅠ能將外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通過DNA連接酶與質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒符合要求，而另一個(gè)重組質(zhì)粒無目的基因，不符合要求．導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞，其重組質(zhì)粒是用PstⅠ和EcoRⅠ酶切割的，其中的Amp^r（氨芐青霉素抗性基因）已被破壞，不能抗氨芐青霉素．

解答 解：A、pBR322質(zhì)粒、抗病基因和重組質(zhì)粒的化學(xué)本質(zhì)都是DNA，所以它們的基本組成單位都是脫氧核苷酸，A正確；
B、形成重組質(zhì)粒時(shí)，需要用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，圖中看到目的基因上含有三種限制酶切割位點(diǎn)，但是Sma I酶的切割位點(diǎn)存在于目的基因中間，因此應(yīng)選用PstⅠ和EcoRⅠ兩種限制酶，對(duì)含抗病基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割，B正確；
C、一個(gè)質(zhì)粒被限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同時(shí)切割后可得到3個(gè)DNA片段和6個(gè)平末端，C錯(cuò)誤；
D、導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞，其重組質(zhì)粒是用PstⅠ和EcoRⅠ酶切割的，其中的Amp^r（氨芐青霉素抗性基因）已被破壞，不能抗氨芐青霉素，所以將受體細(xì)胞置于含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可篩選出已導(dǎo)入抗病基因的受體細(xì)胞，D正確．
故選：C．

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的操作等知識(shí)點(diǎn)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖和理解能力，屬于中檔題，解題的關(guān)鍵是理解標(biāo)記基因結(jié)構(gòu)完整，則能在對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基中生長．