Question

【題目】下圖為用32P標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌（T2噬菌體專門寄生在大腸桿菌體內(nèi)）的實(shí)驗(yàn)，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）圖中錐形瓶中的培養(yǎng)液是用來(lái)培養(yǎng)___________，其內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)成份__________（含有，不含有）32P。

（2）對(duì)下列可能出現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)誤差進(jìn)行

①測(cè)定發(fā)現(xiàn)在攪拌后的上清液中含有0.8%的放射性，最可能的原因是培養(yǎng)時(shí)間較短，有部分噬菌體__________________________。

②當(dāng)接種噬菌體后培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，發(fā)現(xiàn)在攪拌后的上清液中也有放射性，最可能的原因是復(fù)制增殖后的噬菌體___________________________。

（3）請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)給T2噬菌體標(biāo)記上32P的實(shí)驗(yàn)步驟：________________________________

Answer 1

【答案】大腸桿菌不含有沒(méi)有侵入大腸桿菌從大腸桿菌體內(nèi)釋放出來(lái)在含32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌，再用上述大腸桿菌培養(yǎng)噬菌體，得到32P標(biāo)記的噬菌體

【解析】

T2噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟：分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測(cè)上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)。

（1）由于該實(shí)驗(yàn)是用32P標(biāo)記的T2噬菌體侵染大腸桿菌，而錐形瓶中的培養(yǎng)液是用來(lái)培養(yǎng)大腸桿菌的，所以其內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)成分中不能含有32P，以免造成干擾。

（2）32P標(biāo)記的是噬菌體的DNA，噬菌體在侵染細(xì)菌時(shí)，DNA進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)，并隨著細(xì)菌離心到沉淀物中，所以經(jīng)過(guò)離心過(guò)程后，上清液放射性應(yīng)該為0，但實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與理論數(shù)據(jù)之間存在誤差，即離心后上清液中有少量放射性，可能的原因有：

①少量的噬箘體沒(méi)有侵入大腸桿菌內(nèi)，經(jīng)離心后分布在上清液中；

②培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，復(fù)制增殖后的噬菌體從大腸桿菌體內(nèi)釋放出來(lái)，離心后分布在上清液中。

（3）由于噬菌體是病毒，不能在培養(yǎng)基上獨(dú)立生存，只有在活細(xì)胞中才能進(jìn)行正常的生命活動(dòng)。因此要給T2噬菌體標(biāo)記上32P，需要先用含有32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)標(biāo)記大腸桿菌，再用T2噬菌體去感染被32P標(biāo)記大腸桿菌，一段時(shí)間后在培養(yǎng)液中提取出所需要的T2噬菌體，其體內(nèi)的DNA被標(biāo)記上32P。