Question

高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性．研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如如圖所示．請(qǐng)回答下列問題：

（1）實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)采用無菌技術(shù)，防止培養(yǎng)物被微生物污染及

 

被微生物感染，操作者的雙手需要進(jìn)行清潔和

 

處理．
（2）Ⅰ、Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基配置和滅菌時(shí)，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是

 

．
（3）Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中的碳源為

 

．若Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基中的菌落連成一片，最可能的原因是

 

．
（4）部分嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈，應(yīng)挑出透明圈

 

（填“大”或“小”）的菌落接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基，該過程的目的是

 

目的菌；下次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種來源于

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：微生物篩選培養(yǎng)成功的關(guān)鍵是防止雜菌污染培養(yǎng)物和操作者，必須要做好相應(yīng)的消毒或滅菌及嚴(yán)格的無菌操作．從混雜的微生物中篩選目的微生物的一般步驟是：樣品取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．培養(yǎng)基制作完成后要調(diào)整pH，再滅菌，該篩選要使用以淀粉為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基．

解答： 解：（1）整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)采用無菌技術(shù)，防止培養(yǎng)物被微生物污染及操作者自身被微生物感染，實(shí)驗(yàn)前后操作者的雙手需要進(jìn)行清潔和消毒處理．
（2）培養(yǎng)基制作完成后要調(diào)整pH，再滅菌．
（3）Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，該篩選要使用以淀粉為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基．用稀釋涂布平板法接種前需要對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋，如果培養(yǎng)基中的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（或稀釋不夠）．
（4）嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈越大，說明嗜熱菌產(chǎn)生高溫淀粉酶的效率越高，應(yīng)該就是篩選的目的微生物，將其菌落接種到Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基，該過程的目的是純化目的菌，接種時(shí)下次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種來源于上次劃線的末端．
故答案為：
（1）操作者自身    消毒
（2）先調(diào)節(jié)pH，后滅菌 
（3）淀粉   菌液濃度過高（或稀釋不夠）
（4）大      純化      上次劃線的末端

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查微生物的篩選與分離，意在強(qiáng)化學(xué)生篩選分離的過程和微生物培養(yǎng)的無菌操作等知識(shí)．