Question

10．我國科學(xué)家建立了小鼠哺乳動物單倍體胚胎干細(xì)胞系，為基因操作找到了新的動物模型，從而解決了二倍體哺乳動物體細(xì)胞不易進(jìn)行基因操作和篩選，而生殖細(xì)胞已高度分化，不能在體外擴(kuò)增培養(yǎng)的困難．操作過程如圖所示，請據(jù)圖回答：

（1）圖中切割目的基因和載體所用的酶是EcoRI和BamHI，基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止下來．
（2）單倍體胚胎干細(xì)胞取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)是，④過程采用的技術(shù)手段細(xì)胞融合，由此可見，單倍體胚胎干細(xì)胞能夠代替精子，使卵細(xì)胞成功“受精”，支撐小鼠胚胎的全程發(fā)育．
（3）早期胚胎能夠在受體內(nèi)存活的主要生理學(xué)基礎(chǔ)是不發(fā)生免疫排斥．
（4）和生殖細(xì)胞相比，單倍體胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不分化．

Answer 1

分析 分析題圖：①是獲得小鼠的孤雄單倍體胚胎的過程；②是獲取胚胎干細(xì)胞；③是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞中，不同的受體細(xì)胞采用的導(dǎo)入方法不同，如受體細(xì)胞是動物細(xì)胞，常用顯微注射法；④是誘導(dǎo)細(xì)胞融合過程，⑤是早期胚胎培養(yǎng)過程，⑥是胚胎移植過程．

解答 解：（1）含有目的基因的外源DNA分子中含有三種限制酶（EcoRI/SmaI/BamHI）的切割位點(diǎn)，但SmaI的切割位點(diǎn)在目的基因上，使用該酶切割會破壞目的基因，因此應(yīng)選擇EcoRI和BamHI進(jìn)行切割，再用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA．基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止下來．
（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)能發(fā)育成胎兒的各種組織，滋養(yǎng)層將發(fā)育成胎膜和胎盤，因此單倍體胚胎干細(xì)胞取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)．④過程中將胚胎干細(xì)胞和卵母細(xì)胞融合需要采用細(xì)胞融合技術(shù)．
（3）早期胚胎能夠在受體內(nèi)存活的主要生理學(xué)基礎(chǔ)是受體子宮對移入的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥．
（4）和生殖細(xì)胞相比，單倍體胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不分化，而生殖細(xì)胞已高度分化，不能在體外擴(kuò)增培養(yǎng)．
故答案為：
（1）EcoR I和BamH I     基因表達(dá)載體的構(gòu)建    使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止下來
（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)   細(xì)胞融合   
（3）不發(fā)生免疫排斥 
（4）增殖而不分化

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記細(xì)胞工程和胚胎工程涉及的相關(guān)技術(shù)，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．