Question

【題目】已知某傳染性疾病的病原體為 RNA 病毒，該病毒表面的 A 蛋白為主要抗原。疫苗的生產和抗體的制備流程如下圖所示。請回答下列問題：

（1）圖示①過程需要___________________________酶，圖示③為基因工程的核心步驟，其理論基礎是___________________________。

（2）若受體細胞為大腸桿菌，則④過程往往需用氯化鈣處理大腸桿菌，以增加其___________________________的通透性，使其處于感受態(tài)。為提高大腸桿菌轉化率，除了上述處理外，還可以通過___________________________ 來實現(xiàn)。

（3）本抗體制備流程示意圖中所需的 B 淋巴細胞往往須從___________________________的小鼠的脾細胞中選擇。⑤過程可用電刺激、聚乙二醇或___________________________介導實現(xiàn)細胞融合。

（4）圖示雜交細胞往往還需兩次___________________________進行篩選，以便最終獲得既能分泌特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細胞克隆。

（5）制備的單克隆抗體可作為___________________________，研究相應抗原蛋白的結構、細胞學分布及其功能。

Answer 1

【答案】逆轉錄 DNA 分子具有相同的結構 細胞壁 提高重組 DNA 的濃度，增加大腸桿菌的濃度，保持適宜的溫度pH 等 經 A 蛋白刺激，發(fā)生免疫反應 滅活的仙臺病毒（或仙臺病毒） 抗體檢驗 特異探針

【解析】

圖示為疫苗生產和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉錄過程；②是獲取目的基因（A基因）的過程；③是基因表達載體的構建過程；④是將目的基因導入受體細胞的過程；⑤是細胞融合過程；⑥是雜交瘤細胞擴大培養(yǎng)的過程。

（1）由以上分析可知，①是逆轉錄過程，故需要逆轉錄酶；③是基因表達載體的構建，其理論基礎DNA 分子具有相同的結構。

（2）用氯化鈣處理大腸桿菌，增加大腸桿菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質粒進入大腸桿菌宿主細胞；還可以通過提高重組 DNA 的濃度，增加大腸桿菌的濃度，保持適宜的溫度pH 等來提高大腸桿菌轉化率。

（3）制備單克隆抗體所用的B淋巴細胞往往是經過抗原刺激發(fā)生免疫反應的細胞，所以要從經 A 蛋白刺激、發(fā)生免疫反應的小鼠脾細胞中選擇。動物細胞可以在滅火的仙臺病毒或聚乙二醇等物質的介導下實現(xiàn)細胞融合。

（4）雜交后的細胞需要經過培養(yǎng)和抗體檢驗，才能獲得既能分泌特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細胞克隆。

（5）單克隆抗體可以作為特異性探針用于研究相應抗原蛋白的結構、細胞學分布及其功能。