Question

天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過(guò)程才能被利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：?

（1）將淀粉酶基因切割下來(lái)所用的工具是          ，用            將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，下一步將該DNA分子     ，以完成工程菌的構(gòu)建。?

（2）若要鑒定淀粉酶基因是否插入釀酒酵母菌，可采用的檢測(cè)方法是     ；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用     檢測(cè)；將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時(shí)間后，加入碘液，工程菌周?chē)�出現(xiàn)透明圈，該現(xiàn)象發(fā)生的原因是                                                 。

（3）如何進(jìn)一步鑒定不同的轉(zhuǎn)基因工程菌菌株利用淀粉能力的大��？?

                                                                                                                                                                    。

（4）微生物在基因工程領(lǐng)域中有哪些重要作用？?

                                                                                                                                                                    。

Answer 1

 （1）限制酶（限制性內(nèi)切酶） DNA連接酶  導(dǎo)入受體細(xì)胞   （2）DNA分子雜交技術(shù)  抗原—抗體雜交或淀粉酶活性  該工程菌產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基，水解淀粉后的區(qū)域，遇碘不再變藍(lán)色，產(chǎn)生透明圈  （3）測(cè)定相同培養(yǎng)條件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精產(chǎn)量   （4）①工具酶主要來(lái)自微生物；②最重要的目的基因供體庫(kù)之一；③目的基因的載體之一；④作為受體細(xì)胞；⑤提供用于發(fā)酵的工程菌?

解析:

  基因工程操作的工具是限制性內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體；基因工程操作的步驟為提取目的基因——目的基因與運(yùn)載體結(jié)合——將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞——目的基因的檢測(cè)與表達(dá)。目的基因的檢測(cè)有多種手段，如①用基因探針對(duì)目的基因進(jìn)行標(biāo)記，然后在宿主細(xì)胞中檢測(cè)。②DNA分子雜交技術(shù)：利用被標(biāo)記DNA單鏈與目的基因中的DNA鏈進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的原理組成DNA雙鏈，如果雙鏈出現(xiàn)雜交帶就表明目的基因已導(dǎo)入。③抗原—抗體雜交技術(shù)：檢測(cè)目的基因是否能翻譯出蛋白質(zhì)，利用抗體對(duì)抗原的專一性。④全基因組PCR檢測(cè)（前提是宿主細(xì)胞沒(méi)有該基因）：看是否有目的基因上目的大小片段，再做瓊脂糖電泳鑒定。微生物在基因工程具有重要的作用，如獲取運(yùn)載體，用來(lái)生產(chǎn)多肽藥物等。?