【題目】釀酒酵母不能利用木糖制約了利用植物原料生產(chǎn)乙醇的經(jīng)濟效益。木酮糖激酶是木糖轉(zhuǎn)化、利用的關(guān)鍵 酶，為提高酵母細胞中木酮糖激酶的表達量，科研人員將兩種啟動子與木酮糖激酶基因結(jié)合并導(dǎo)入釀酒酵母細胞，構(gòu)建 能同時利用葡萄糖和木糖的重組釀酒酵母。下圖表示相關(guān)研究過程，表是幾種限制性內(nèi)切酶的識別序列及切割位 點。請回答：

（1）重組質(zhì)粒中終止子的作用是 ____________________。表中切割 DNA 后形成相同黏性末端的限制性內(nèi)切酶是__________________，黏性末端為___________ 。

（2）過程③使用的限制性內(nèi)切酶是 _________________。過程⑤需先用 LiAc 處理釀酒酵母細胞，其目的是 _________________________________ ，使細胞處于能吸收環(huán)境中DNA的狀態(tài)。

（3）結(jié)合圖示分析，進行工程菌篩選時，在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上長出的菌落不一定是導(dǎo)入重組質(zhì)粒的釀酒酵母，這是因為 _____________________________________ 。

（4）研究人員對篩選得到的兩種重組酵母(甲中導(dǎo)入啟動子 A，乙中導(dǎo)入啟動子 B)細胞中木酮糖激酶活力及發(fā)酵乙醇得率進行比較(發(fā)酵條件：1 L 15 g·L－1 的葡萄糖和 50 g·L－1 的木糖培養(yǎng)基中，120 h)結(jié)果如下表。

重組釀酒酵母

木酮糖激酶酶活力U． mg-2

葡萄糖消耗量g．L-1

木糖消耗量g． L-I

乙醇得率g/g

重組釀酒酵母甲

0． 24

14． 59

48．61

0．34

重組釀酒酵母乙

0． 56

14．98

49．39

0．39

從木酮糖激酶酶活力分析，可以得出的結(jié)論是啟動子 A 的功能比啟動子B____，但本實驗中乙醇得率相差不大，其可能的原因是____。

【答案】使轉(zhuǎn)錄終止（或使RNA聚合酶與模板分離） XhoⅠ與SalⅠ -AGCT（或TCGA-） EcoRⅠ、BamHⅠ 增大酵母細胞的通透性 普通質(zhì)粒上有抗四環(huán)素基因，導(dǎo)入普通質(zhì)粒的酵母也能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長繁殖 弱 實驗中發(fā)酵時間過長（或培養(yǎng)基中的葡萄糖和木糖含量過少）

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）重組質(zhì)粒中終止子的作用是使轉(zhuǎn)錄終止；根據(jù)表中6種限制酶的識別序列及切割位點可知，它們形成的黏性末端依次是-AATT、-GATC、-AGCT、-TCGA、-TA、-TCGA，因此切割DNA后形成相同黏性末端的限制性內(nèi)切酶是XhoⅠ與SalⅠ，黏性末端為-AGCT（或TCGA-）。

（2）過程①構(gòu)建的重組DNA的兩端含有限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的識別序列，因此過程③使用的限制性內(nèi)切酶也是EcoRⅠ、BamHⅠ；過程⑤需先用LiAc處理釀酒酵母細胞，其目的是增大酵母細胞的通透性，使細胞處于能吸收環(huán)境中DNA的狀態(tài)。

（3）由于普通質(zhì)粒上有抗四環(huán)素基因，導(dǎo)入普通質(zhì)粒的酵母也能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長繁殖，因此進行工程菌篩選時，在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上長出的菌落不一定是導(dǎo)入重組質(zhì)粒的釀酒酵母。

（4）甲中導(dǎo)入啟動子A，乙中導(dǎo)入啟動子B，甲中木糖消耗量小于乙，說明啟動子A的功能比啟動子B弱，但本實驗中乙醇得率相差不大，其可能的原因是實驗中發(fā)酵時間過長（或培養(yǎng)基中的葡萄糖和木糖含量過少）。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】某種雌雄異株植物的性別決定方式為XY型，其葉型有寬葉和窄葉兩種，受位于性染色體上的一對等位基因A、a控制。研究人員用純合的寬葉和窄葉雌雄植株作親本進行雜交實驗，其中F1自由交配得F2，結(jié)果如下：

親本

F1

F2

實驗一

寬葉（♂）×窄葉（♀）

全為寬葉

寬葉（♀）∶窄葉（♀）∶寬葉（♂）=1∶1∶2

實驗二

寬葉（♀）×窄葉（♂）

全為寬葉

寬葉（♀）∶窄葉（♂）∶寬葉（♂）=2∶1∶1

請回答下列問題：

（1）該植物的寬葉和窄葉屬于顯性性狀的是_________。該植物葉型的遺傳符合分離定律，判斷的依據(jù)是_________。

（2）如圖所示，X、Y染色體存在同源區(qū)段I和非同源區(qū)段Ⅱ-1、Ⅱ-2。從表中實驗結(jié)果

①基因A、a不會位于Ⅱ-1，原因是__________________________。

②基因A、a不會位于Ⅱ-2，原因是___________________________。

（3）該植物種群中寬葉雄株的基因型有________種。若需確定實驗一F2中某寬葉雄株的基因型，需要將該寬葉雄株與________進行雜交。讓雜交組合二的F2雌雄個體隨機傳粉，理論上子代窄葉植株所占比例為________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】當(dāng)某些基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA分子難與模板鏈分離時，會形成RNA-DNA雜交體，這時非模板鏈、RNA-DNA雜交體共同構(gòu)成R環(huán)結(jié)構(gòu)。研究表明R環(huán)結(jié)構(gòu)會影響DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和基因的穩(wěn)定性等。下圖為某細胞遺傳信息的傳遞和表達過程的示意圖。請回答下列問題：

（1）酶A的作用是_____________(填寫下列選項的編號)。

A．催化兩個游離的脫氧核苷酸形成磷酸二酯鍵

B．將游離的脫氧核苷酸連接到新合成的DNA子鏈上

C．將兩條脫氧核酸鏈之間的氫鍵破壞

D．將新合成的L鏈片段進行連接

（2）酶C的名稱是___________，與酶A相比，除了有著相同的催化效應(yīng)外，還能使DNA分子中的_______斷裂。酶C催化過程的產(chǎn)物與過程1的產(chǎn)物在化學(xué)組成上的區(qū)別是__________________________________________________________。

（3）R環(huán)結(jié)構(gòu)的形成往往與DNA分子中某種堿基對的數(shù)量有關(guān)，推測該片段可能含有較多的________堿基對，使mRNA不易脫離模板鏈。

（4）R環(huán)的形成還會_________(提高、降低）DNA的穩(wěn)定性，從而引起___________。

（5）過程2中，一個mRNA上可同時連接多個核糖體，其意義在于_____________________。

（6）圖示為原核細胞的遺傳信息的傳遞和表達過程，判斷依據(jù)是____________________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖所示為幾項生物工程技術(shù)綜合實驗研究的流程圖。下列相關(guān)敘述，不正確的是（ ）

A.整個流程運用的生物技術(shù)有轉(zhuǎn)基因、動物細胞培養(yǎng)以及細胞融合等

B.過程②是誘導(dǎo)干細胞中基因選擇性表達的結(jié)果

C.過程③得到的 Z 細胞還需要進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測及多次篩選

D.圖中的肝細胞、神經(jīng)細胞和 Y 細胞具有相同的基因組成

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】細胞融合法是將性質(zhì)不同的兩種細胞的優(yōu)點結(jié)合起來而培養(yǎng)出有用的細胞的技術(shù)。下表中提供了兩種細胞：漿細胞和 癌細胞，下圖表示了通過選擇性培養(yǎng)基得到雜種細胞的原理。(完全培養(yǎng)基：在最佳條件下能夠使細胞增殖的具備各種營 養(yǎng)成分的一種培養(yǎng)基。選擇性培養(yǎng)基：選擇性地使特定細胞增殖的培養(yǎng)基)

漿細胞

癌細胞

能合成抗體

不能合成抗體

能在選擇培養(yǎng)基上增殖

不能在選擇培養(yǎng)基上增殖

在任何培養(yǎng)基上壽命都短(約10日左右)

在完全培養(yǎng)基上的壽命是半永久的

用上述技術(shù)培養(yǎng)出來的雜種細胞群的特征中，下列敘述正確的是（ ）

①在完全培養(yǎng)基上不能增殖②在選擇培養(yǎng)基上，壽命是半永久的③可以永久性地合成抗體

A.③B.①③C.②D.①②③

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】下圖所示特異性免疫的部分環(huán)節(jié)，相關(guān)敘述錯誤的是（ ）

A.吞噬細胞和T細胞都能特異性識別抗原

B.吞噬細胞具有攝取處理和傳遞抗原的作用

C.若圖示表示細胞免疫，則T細胞將進行增殖分化

D.若圖示表示體液免疫，則T細胞將分泌淋巴因子

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】日前微博傳言手機屏幕比馬桶按鈕單位面積上的細菌多，為辨別真?zhèn)�，兩電視臺利用微生物培養(yǎng)技術(shù)進行實驗，過程及結(jié)果如下。下列敘述錯誤的是

A. 本實驗采用稀釋涂布平板法接種

B. 本實驗不需要設(shè)置對照組實驗

C. 本實驗使用的培養(yǎng)基應(yīng)含有水、碳源、氮源和無機鹽

D. 兩個報道結(jié)果不同，可能是因為取樣環(huán)境不同

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖所示，圖甲表示某植物葉肉細胞光合作用和有氧呼吸作用的過程，其中①～⑧表示有關(guān)生理過程，圖乙表示該植物在適宜條件下，環(huán)境中的CO2濃度與CO2吸收量之間的關(guān)系曲線，M點是能夠進行光合作用的CO2最低濃度。據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖甲中，⑦過程進行的場所是__________，消耗O2的生理過程是__________（填序號）。

（2）當(dāng)CO2濃度處于圖乙中C點時，光合作用速率__________呼吸作用速率（填“大于”“小于”或“等于”），當(dāng)CO2濃度由N點變?yōu)?/span>C點時，植物葉肉細胞內(nèi)，C3含量的變化為__________（填“升高”“降低”或“不變”）。

（3）圖乙中B點之前，該植物葉肉細胞中能進行圖甲中的生理過程有__________（填序號）。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】為探究酵母菌的呼吸方式，在連通CO2和O2傳感器的100mL錐形瓶中，加入40mL活化酵母菌和60mL葡萄糖培養(yǎng)液，密封后在最適溫度下培養(yǎng)。培養(yǎng)液中O2和CO2相對含量變化見下圖。有關(guān)分析錯誤的是（　�。�

　

A. t1→t2，酵母菌的有氧呼吸速率不斷下降

B. t3時，培養(yǎng)液中葡萄糖的消耗速率比t1時快

C. 若降低10℃培養(yǎng)，O2相對含量達到穩(wěn)定所需時間會縮短

D. 實驗后的培養(yǎng)液濾液加入適量酸性重鉻酸鉀溶液后變成灰綠色

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