Question

【題目】腸出血性大腸桿菌是能導(dǎo)致人體患病的為數(shù)不多的幾種大腸桿菌中的一種，人體感染該種大腸桿菌后的主要癥狀是出血性腹瀉，感染嚴重者可出現(xiàn)溶血性尿毒綜合征( HUS)，危及生命。該大腸桿菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色，從而形成透明圈。下圖為從被腸出血性大腸桿菌污染的食物中分離和提純該大腸桿菌的操作流程示意圖。請回答下列相關(guān)問題：

（1）肉湯培養(yǎng)基可為培養(yǎng)的微生物提供的營養(yǎng)成分包括____。

（2）以上操作中在血平板上的接種方法是________；第一次接種操作前和整個接種操作結(jié)束后均需要對接種工具進行灼燒滅菌，其目的分別是 ___和____。

（3）為了進一步研究該大腸桿菌的抗原性，常利用 ___法分離其蛋白質(zhì)，若甲蛋白質(zhì)比乙蛋白質(zhì)后洗脫出來，則相對分子質(zhì)量較大的是____。在裝填凝膠柱時，不得有氣泡產(chǎn)生，是因為________________

Answer 1

【答案】碳源、氮源、水、無機鹽等 平板劃線法 殺死接種環(huán)上的微生物避免污染培養(yǎng)基（滅菌） 避免污染環(huán)境和感染操作者 凝膠色譜 乙蛋白質(zhì) 氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫順序，降低分離效果

【解析】

凝膠色譜法是根據(jù)分子量的大小分離蛋白質(zhì)的方法之一。相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢；而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快，先從層析柱中洗脫出來。

（1）肉湯培養(yǎng)基中含有蛋白質(zhì)，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和無機鹽，所以提供的營養(yǎng)物質(zhì)為碳源、氮源、水和無機鹽。

（2）據(jù)圖可知，分離純化大腸桿菌的方法為平板劃線法。第一次接種操作前灼燒接種工具是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基；劃線結(jié)束后灼燒是殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。

（3）凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。由分析可知，乙蛋白質(zhì)先洗脫出來，所以乙的相對分子質(zhì)量較大。色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)氣泡，必須重裝，因為氣泡會在色譜柱內(nèi)形成無效的空隙，使本該進入凝膠內(nèi)部的分子從這些空隙通過，攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。