Question

12．多不飽和脂肪酸需要從膳食中攝取，而不能被人體直接合成．科學家通過轉基因手段將w-6脂肪酸脫氫酶基因（FAT1）整合到肉�；�因組，以期提高肉牛體內(nèi)的多不飽和脂肪酸含量，促進人體健康．請回答下列問題：
（1）將w-6脂肪酸脫氫酶基因（FAT1）導入到肉牛細胞中常用的方法是顯微注射法，在用PCR技術擴增目的基因時，需要的條件除擴增緩沖液、模板DNA、4種原料和能量外，還需要引物和Taq酶．
（2）構建好的基因表達載體主要包括復制原點、啟動子、目的基因、終止子和標記基因，其中啟動子功能是RNA聚合酶識別和結合位點，驅動基因轉錄出mRNA．
（3）哺乳動物的脂肪細胞來源于前脂肪細胞，脂肪組織體積增大是前脂肪細胞分裂和分化和脂肪細胞的生長結果．
（4）在體外培養(yǎng)前脂肪細胞，需過濾脂肪組織血管基質(zhì)，并經(jīng)胰蛋白酶消化而得到單個前脂肪細胞，進行原代培養(yǎng)．體外培養(yǎng)細胞的操作及培養(yǎng)過程均需要在無菌條件下進行．成熟組織細胞間質(zhì)少、細胞松散，所以隨著前脂肪細胞的分化，細胞貼壁生長性能下降．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
2、基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
3、將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
4、目的基因的檢測與鑒定：
（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．
（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法；在用PCR技術擴增目的基因時，需要的條件主要有擴增緩沖液、模板DNA、4種原料、特定引物和Taq酶（或熱穩(wěn)定DNA聚合酶）．
（2）構建好的基因表達載體主要包括復制原點、啟動子、目的基因、終止子和標記基因，其中啟動子功能是RNA聚合酶識別和結合位點，驅動基因轉錄出mRNA．
（3）哺乳動物的脂肪細胞來源于前脂肪細胞，脂肪組織體積增大是前脂肪細胞分裂和分化和脂肪細胞的生長結果．
（4）在體外培養(yǎng)前脂肪細胞，需過濾脂肪組織血管基質(zhì)，并經(jīng)胰蛋白酶消化而得到單個前脂肪細胞，進行原代培養(yǎng)．體外培養(yǎng)細胞的操作及培養(yǎng)過程均需要在無菌條件下進行．成熟組織細胞間質(zhì)少、細胞松散，所以隨著前脂肪細胞的分化，細胞貼壁生長性能下降．
故答案為：
（1）顯微注射法         引物和Taq酶
（2）RNA聚合酶識別和結合位點，驅動基因轉錄出mRNA
（3）分裂和分化      生長
（4）胰蛋白酶         無菌       下降

點評 本題考查基因工程、植物組織培養(yǎng)等知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具、操作步驟等知識，識記動物細胞培養(yǎng)的過程，再結合所學的知識答題．