Question

2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內部的移動情況，幫助推斷蛋白質的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖，據圖回答：

（1）圖中通過過程①、②形成重組質粒，需要限制性內切酶切取目的基因、切割質粒。限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點。

①請畫出質粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接？

理由是： 。

（2）過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是 。

（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是 。獲得的轉基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學難題是，可以避免 。

（4）目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是： （填序號）。

①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列

③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）

④表達出藍色熒光蛋白。

Answer 1