Question

8．我國規(guī)定1升自來水中大腸桿菌不得超過3個．在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍，可以使大腸桿菌的菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤．有關部門據(jù)此對自來水中的大腸桿菌進行檢測．具體步驟大致如下：
（一）用火焰灼燒自來水龍頭3分鐘，然后打開水龍頭放水5分鐘，再用無菌的三角瓶接取1000毫升水樣，蓋好瓶塞．
（二）將漏斗和抽濾瓶固定好，用鑷子夾住濾膜邊緣，將水樣倒入漏斗中，邊抽濾、邊加水．
（三）用鑷子將濾膜取出、放在無菌平板上進行培養(yǎng)，觀察并記錄實驗結果．
回答下列問題：
（1）實驗中所用的醋酸纖維素濾膜、漏斗、抽濾瓶、鑷子等實驗器材和培養(yǎng)基都需先用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．如需檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底，常用的方法是將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．
（2）制作本實驗所用的無菌平板時，需要加入碳源和氮源、水、無機鹽等大腸桿菌所必需的營養(yǎng)成分，以及加入瓊脂，便于統(tǒng)計菌落外；還需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)整至中性或微堿性．鑒別是否有大腸桿菌菌落，需要在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍．
（3）按上述步驟制作的3個樣品平板上所有的菌落數(shù)分別為49、51、47．能否據(jù)此得出每升水樣中大腸桿菌數(shù)約為49的結論？不能．理由是培養(yǎng)基表面生長的菌落，只有部分是大腸桿菌的菌落．

Answer 1

分析 1、實驗室常用的消毒方法：煮沸消毒、化學藥物消毒；紫外線消毒．
2、實驗室常用的滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌．
3、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用．

解答 解：（1）培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底，可以設置空白對照，即將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生．
（2）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基需要碳源、氮源、水和無機鹽．統(tǒng)計微生物數(shù)目一般用稀釋涂布平板法，該培養(yǎng)基屬于固定培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基需要加入瓊脂．大腸桿菌生長的最適合pH為中性或微堿性，伊紅美藍是專一鑒定大腸桿菌的指示劑，利用伊紅美蘭培養(yǎng)基可以鑒定大腸桿菌．
（3）該培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，在平板上生長的菌落，只有部分是大腸桿菌形成的菌落，因此大腸桿菌數(shù)實際數(shù)值應該小于49．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌  將滅菌過的培養(yǎng)基在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生  
（2）碳源和氮源  瓊脂  中性或微堿  伊紅美藍  
（3）不能  培養(yǎng)基表面生長的菌落，只有部分是大腸桿菌的菌落

點評 本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠識記滅菌和消毒的方法，掌握空白對照組的設置方法，識記培養(yǎng)基中類型，識記鑒別大腸桿菌的實驗原理和方法，再結合所學知識準確答題．