13.如圖是對Ⅰ型糖尿病大鼠進行基因治療的示意圖,據(jù)圖回答:

【注:Proinsulin DNA(胰島素原基因);PCMV(某種質(zhì)粒);kanr(卡那霉素抗性基因);EcoRⅠ、ClaⅠ、HindⅢ(限制性核酸內(nèi)切酶)】
(1)總RNA來自于胰腺細胞 (填“胰腺細胞”或“骨骼肌細胞”),過程②是利用PCR技術(shù)從cDNA文庫中擴增出大量的Proinsulin DNA.該技術(shù)的前提是需要根據(jù)所需片段的一段核苷酸序列合成引物.
(2)過程③需要用EcoRI、HindⅢ、DNA連接酶酶構(gòu)建出PCMV/Proinsulin DNA重組質(zhì)粒,再將該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到處于感受態(tài)的細菌中,培養(yǎng)基加入卡那霉素的目的是篩選出含有重組質(zhì)粒的細菌.
(3)為探明Proinsulin DNA在治療中的作用,除需要以不作處理的Ⅰ型糖尿病大鼠作為對照組之外,還需設(shè)置注射了同等劑量PCMV的Ⅰ型糖尿病大鼠作為對照,通過比較實驗組和對照組血液中血糖濃度(或胰島素濃度)來評估該基因治療的效果.

分析 分析題圖:圖中①為逆轉(zhuǎn)錄過程,②是用限制酶切割獲取目的基因的過程,③是基因表達載體的構(gòu)建過程,之后再將目的基因?qū)胧荏w細胞,最后進行篩選和鑒定.

解答 解:(1)胰島素基因只在胰腺中的胰島B細胞中才表達,因此總RNA來自于胰腺細胞;利用PCR技術(shù)可以在體外大量擴增目的基因,該技術(shù)的前提是需要根據(jù)所需片段的一段核苷酸序列合成引物.
(2)目的基因兩側(cè)分別是限制酶EcoRI、HindⅢ的酶切位點,因此切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體需要這兩種限制酶,其次還需要DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組質(zhì)粒;將目的基因?qū)胛⑸锛毎S酶惺軕B(tài)轉(zhuǎn)化法,即用鈣離子處理微生物細胞,使之成為感受態(tài);培養(yǎng)基加入卡那霉素的目的是篩選出含有重組質(zhì)粒的細菌.
(3)為探明Proinsulin DNA在治療中的作用,除需要以不作處理的Ⅰ型糖尿病大鼠作為對照組之外,還需設(shè)置注射了同等劑量 PCMV的Ⅰ型糖尿病大鼠作為對照,通過比較實驗組和對照組血液中血糖濃度(或胰島素濃度)來評估該基因治療的效果.
故答案為:
(1)胰腺細胞     PCR       引物
(2)EcoRI、HindⅢ、DNA連接酶      感受態(tài)    篩選出含有重組質(zhì)粒的細菌
(3)PCMV      血糖濃度(或胰島素濃度)

點評 本題結(jié)合圖解,考查基因工程的相關(guān)知識,要求考生識記基因工程的原理、操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié),能結(jié)合圖中信息準確答題.

練習冊系列答案
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5.下列關(guān)于種群特征的說法中正確的是( 。
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18.在檢測生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的實驗中,將0.1g/mL的NaOH和0.05g/mL的CuSO4等量均勻混合,可用于檢測( 。
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5.水稻細胞進行有絲分裂時,紡錘體和細胞板形成時期分別是( 。
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2.如圖表示人體內(nèi)生命活動調(diào)節(jié)機制的模型,請回答下列問題:
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(2)若該模型表示水平衡調(diào)節(jié)過程,當人吃的食物過咸時,A可能代表體內(nèi)細胞外液滲透壓(生理指標)的上升,進而刺激人體內(nèi)下丘腦(器官名稱)中相應(yīng)的感受器,使該器官產(chǎn)生的激素是抗利尿激素.
(3)若該模型表示人體內(nèi)甲狀腺激素分泌的分級調(diào)節(jié)過程,則該過程存在反饋調(diào)節(jié)機制.
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