Question

【題目】國家863計劃項目“利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用蛋白”取得重大進(jìn)展。 目前，已經(jīng)成功獲得經(jīng)純化的抗凝血酶Ⅲ蛋白，達(dá)到國際先進(jìn)水平。下面是制作嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器的流程圖，回答相關(guān)問題。

（1）與嶗山奶山羊相比，一般不選用小鼠作為乳腺生物反應(yīng)器的主要原因是__________________。

（2）PCR擴(kuò)增抗凝血酶Ⅲ基因時，復(fù)性時冷卻溫度的設(shè)定是成功的關(guān)鍵，因為溫度過高會破壞 _____之間相應(yīng)堿基的配對。過程③為________________，此過程需將該藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，目的是______________________________________________。

（3）過程①需將重組質(zhì)粒注入受精卵內(nèi)，而不是動物體細(xì)胞內(nèi)，其原因是_______________________。

（4）在進(jìn)行過程⑤之前，需取囊胚期的___________細(xì)胞做性別鑒定；隨后對篩選的胚胎進(jìn)行分割獲得同卵雙胎。胚胎分割時，要將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割的原因是 ______________________________。

Answer 1

【答案】小鼠產(chǎn)奶量少 兩種引物分別于兩條模板鏈 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 使目的基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá) 體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)全能性十分困難 滋養(yǎng)層 防止影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育

【解析】

圖示是利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用蛋白的流程圖，其中①表示卵細(xì)胞的采集和培養(yǎng)，②表示精子的采集和獲取，③表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，④表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，⑤表示胚胎移植。

（1）該工程的目的是“利用嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器制備藥用蛋白”，因此相比較于山羊，小鼠的產(chǎn)奶量很少；

（2）氫鍵受熱易分解，在PCR擴(kuò)增抗凝血酶Ⅲ基因時，需要將引物加到兩條模板鏈上，溫度過高會破壞兩種引物分別于兩條模板鏈的堿基對；③將目的基因與質(zhì)粒重組，因此屬于基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將該藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起可以使目的基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)；

（3）相比較于動物體細(xì)胞，受精卵的全能性更強(qiáng)，體細(xì)胞的化程度高，恢復(fù)全能性十分困難；

（4）在進(jìn)行胚胎移植之前，若要進(jìn)行性別鑒定，可以取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行檢測；在胚胎分割時，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。