（10分）綠色熒光蛋白能在紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，水母中含有綠色熒光蛋白基因。2006年12月22日，我國(guó)首例3頭“綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬”誕生。綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬培育過(guò)程示意圖如下：

       請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。

   （1）綠色熒光蛋白基因一般在基因工程中最適于做               基因。

   （2）②過(guò)程所需要的酶有                      ，③表示將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞，常采用的方法：                     。

   （3）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬是否培育成功，需要經(jīng)過(guò)鑒定。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出鑒定方法，以及能說(shuō)明轉(zhuǎn)基因成功的現(xiàn)象?

   （4）經(jīng)過(guò)鑒定，其中有2頭在轉(zhuǎn)基因性狀上表現(xiàn)明顯。另一頭還有待DNA鑒定，其方法是用                   制成探針，然后再進(jìn)行檢測(cè)。

 

【答案】

 

   （1）標(biāo)記（2分）

   （2）限制民生內(nèi)切酶（1分）   DNA連接酶（1分）  侵染或顯微注射技術(shù)（2分）

   （3）用紫外光照射轉(zhuǎn)基因豬，如果在紫外光源激發(fā)下，觀察到明顯的綠色熒光，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因豬的培育成功（2分）

   （4）放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的綠色熒光蛋白基因（2分）

【解析】

 

練習(xí)冊(cè)系列答案
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（10分）2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，據(jù)圖回答：

注：圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。
（1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來(lái)？并說(shuō)出理由：                                  
（2）過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多的方法是     。
（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是         。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以通過(guò)對(duì)抗原表達(dá)基因的改造從而解決的醫(yī)學(xué)難題是：可以避免             。
（4）目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是：        （用數(shù)字表示）。
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列   ②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列 ③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）   ④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。

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科目：高中生物 來(lái)源：2010-2011學(xué)年江西省南昌二中高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型：綜合題

2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，據(jù)圖回答：

（1）圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。
①請(qǐng)畫(huà)出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是否可以連接起來(lái)，        理由是：               。
（2）過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是______。
（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是                 。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學(xué)難題是，可以避免                。

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科目：高中生物 來(lái)源：2010年廣西南寧二中高三10月月考（理綜）生物部分 題型：綜合題

（10分）綠色熒光蛋白能在紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，水母中含有綠色熒光蛋白基因。2006年12月22日，我國(guó)首例3頭“綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬”誕生。綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬培育過(guò)程示意圖如下：

請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。
（1）綠色熒光蛋白基因一般在基因工程中最適于做              基因。
（2）②過(guò)程所需要的酶有                     ，③表示將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞，常采用的方法：                    。
（3）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬是否培育成功，需要經(jīng)過(guò)鑒定。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出鑒定方法，以及能說(shuō)明轉(zhuǎn)基因成功的現(xiàn)象?
（4）經(jīng)過(guò)鑒定，其中有2頭在轉(zhuǎn)基因性狀上表現(xiàn)明顯。另一頭還有待DNA鑒定，其方法是用                  制成探針，然后再進(jìn)行檢測(cè)。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

綠色熒光蛋白能在紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，水母中含有綠色熒光蛋白基因。2006年12月22日，我國(guó)首例3頭“綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬”誕生。綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬培育過(guò)程示意圖如下：

       請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。

   （1）綠色熒光蛋白基因一般在基因工程中最適于做               基因。

   （2）②過(guò)程所需要的酶有                      ，③表示將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞，常采用的方法：                     。

   （3）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬是否培育成功，需要經(jīng)過(guò)鑒定。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出鑒定方法，以及能說(shuō)明轉(zhuǎn)基因成功的現(xiàn)象?

   （4）經(jīng)過(guò)鑒定，其中有2頭在轉(zhuǎn)基因性狀上表現(xiàn)明顯。另一頭還有待DNA鑒定，其方法是用                   制成探針，然后再進(jìn)行檢測(cè)。

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