Question

10．有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同學欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株．回答問題：
（1）在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上．從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種時所用的接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落．
（3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力強．
（4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．無菌技術要求實驗操作應在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染．

Answer 1

分析 （1）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（2）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．

解答 解：（1）欲篩選出能降解原油的菌株，培養(yǎng)基中應只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養(yǎng)基上不能生存，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）分離純化菌種時，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便純化菌種．接種時所用的接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，從而將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落．
（3）降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大．
（4）實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無菌技術要求實驗操作應在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染．
故答案為：
（1）原油 　選擇　
（2）平板劃線法   　稀釋涂布平板法   　灼燒   　上一次劃線的末端        將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落　　
（3）強
（4）干熱滅菌   　高壓蒸汽滅菌    　火焰

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)以及培養(yǎng)基對微生物的選擇作用，要求考生能夠掌握微生物培養(yǎng)過程中的無菌技術的主要內(nèi)容，識記微生物分離與純化常用接種方法，根據(jù)培養(yǎng)的要求確定選擇培養(yǎng)基的成分等．