Question

【題目】菊天牛是菊花的主要害蟲之一。科研人員將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答：

（注：卡那霉素抗性基因（kanR）作為標(biāo)記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感）

（1）質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，其化學(xué)本質(zhì)是________，此外還可用______作為載體。

（2）下圖限制酶M和N切割產(chǎn)生的黏性末端是__________，連接它們所需要的基本工具是___________________。

（3）為了促進(jìn)土壤農(nóng)桿菌吸收重組質(zhì)粒，可用_______處理，使其處于感受態(tài)。

（4）將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加__________、營養(yǎng)物質(zhì)以及___________和瓊脂的固體培養(yǎng)基中，在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)，篩選轉(zhuǎn)基因菊花。

（5）將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當(dāng)比例混合后飼喂菊天牛2 齡幼蟲，實驗結(jié)果如下表所示。請據(jù)表回答：

組別		死亡率（%）
實驗組	轉(zhuǎn)基因植株1	60.00
	轉(zhuǎn)基因植株2	53.33
對照組		13.33

①對照組應(yīng)飼喂等量的_________________________________________________。

②據(jù)表分析，_____________________________差異顯著，說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用。

Answer 1

【答案】（小型環(huán)狀）DNA 噬菌體、動植物病毒 GATC—(—CTAG) DNA連接酶 Ca2+（或“CaCl2”） 一定濃度植物激素 卡那霉素 非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料的混合物 實驗組與對照組死亡率

【解析】

基因工程常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒等，質(zhì)粒上具有復(fù)制原點(diǎn)，能自我復(fù)制，本質(zhì)是小型環(huán)狀DNA；通常用氯化鈣溶液處理微生物細(xì)胞，使之處于能夠吸收周圍DNA的狀態(tài)；根據(jù)題意，若要初步篩選轉(zhuǎn)基因菊花，可將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素、營養(yǎng)物質(zhì)以及卡那霉素的固體培養(yǎng)基中。

（1）質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，其化學(xué)本質(zhì)是小型環(huán)狀DNA，此外還可用噬菌體、動植物病毒作為載體。

（2）下圖限制酶M和N切割產(chǎn)生的黏性末端是GATC—(—CTAG)，連接它們所需要的基本工具是DNA連接酶。

（3）為了促進(jìn)土壤農(nóng)桿菌吸收重組質(zhì)粒，可用CaCl2處理，使其處于感受態(tài)。

（4）根據(jù)題意，卡那霉素抗性基因kanR作為標(biāo)記基因，故要篩選轉(zhuǎn)基因菊花，需要將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素、營養(yǎng)物質(zhì)以及卡那霉素的固體培養(yǎng)基中。

（5）①該實驗的自變量為菊花種類，因變量為菊天牛2齡幼蟲死亡率，故對照組應(yīng)飼喂等量的正常菊花嫩莖及葉片與人工飼料。

②據(jù)表格分析，實驗組和對照組2齡幼蟲死亡率差異顯著，實驗組死亡率高得多，說明轉(zhuǎn)基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用。