Question

10．如圖表示轉(zhuǎn)基因煙草的培育過(guò)程．請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）圖示過(guò)程將外源基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，若將外源基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞，目前采用最多、最有效的是顯微注射技術(shù)．
（2）為便于鑒別受體細(xì)胞中是否含有外源基因，攜帶外源基因的質(zhì)粒上應(yīng)有標(biāo)記基因，還應(yīng)有啟動(dòng)子 終止子，以利于外源基因的表達(dá)．
（3）該過(guò)程中用到的植物細(xì)胞工程技術(shù)是植物組織培養(yǎng)，這項(xiàng)技術(shù)應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行，依據(jù)的生物學(xué)原理是植物細(xì)胞具有全能性．
（4）外源基因的檢測(cè)首先要采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因，其次采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，最后通過(guò)抗原-抗體雜交檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）圖示過(guò)程將外源基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將外源基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（2）基因表達(dá)載體的組成包括標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子和目的基因，其中標(biāo)記基因有利于鑒別受體細(xì)胞中是否含有外源基因，啟動(dòng)子和終止子與目的基因的表達(dá)有關(guān)．
（3）該過(guò)程中用到的植物細(xì)胞工程技術(shù)是植物組織培養(yǎng)，其依據(jù)的生物學(xué)原理是植物細(xì)胞具有全能性．植物組織培養(yǎng)技術(shù)需在無(wú)菌條件下進(jìn)行．
（4）外源基因的檢測(cè)首先要采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，其次采用分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，最后通過(guò)抗原-抗體雜交檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)．
故答案為：
（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法      顯微注射
（2）標(biāo)記基因     啟動(dòng)子、終止子
（3）植物組織培養(yǎng)    無(wú)菌      植物細(xì)胞具有全能性
（4）轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因      目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA            目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．