Question

運用動物體細胞雜交技術(shù)可實現(xiàn)基因定位。研究發(fā)現(xiàn)：用人的細胞與小鼠體細胞進行雜交得到的雜種細胞含有雙方的染色體。雜種細胞在持續(xù)分裂過程中僅保留鼠的染色體而人類染色體則逐漸丟失，只剩一條或幾條。右圖是人的缺乏 HGPRT 酶突變細胞株（ HGPRT^-）和小鼠的缺乏 TK 酶細胞株（TK^-）融合后并在 HAT 培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程，結(jié)果表明最終人的染色體在融合細胞中僅存有 3 號染色體或 17 號染色體或兩者都有。已知只有同時具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合細胞才可在 HAT 培養(yǎng)液中長期存活與繁殖。

⑴體細胞雜交克服了     ▲     ，過程①常用的生物方法是     ▲     。

⑵過程②中，為了防止細菌的污染，所用培養(yǎng)液應該添加一定量的     ▲     ，此外還要定期用     ▲     處理細胞，使貼壁生長的細胞脫落形成細胞懸液。

⑶從培養(yǎng)過程看HAT 培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料，還起     ▲     作用。

⑷從圖示結(jié)果看，可以確定人的     ▲     基因位于     ▲     號染色體；該方法可以對鼠基因定位嗎？     ▲     。

 

Answer 1

【答案】

⑴遠緣雜交不親和（或生殖隔離）   用滅活的（仙臺／動物）病毒誘導融合   ⑵抗生素      胰蛋白酶 ⑶選擇（篩選） ⑷ TK 酶  17   不能

【解析】這是利用動物細胞融合進行染色體上基因定位的應用實例。題中，選擇融合的人與鼠的細胞，分別是人的缺乏 HGPRT 酶突變細胞株（ HGPRT - ）和小鼠的缺乏 TK 酶細胞株（ TK 一）。由于融合后的細胞，鼠的染色體全部保留了下來，因此融合細胞不會缺少HGPRT酶，是否缺乏TK酶，取決于人的決定TK酶基因的染色體是否在融合后會缺失。由于能夠在HTA培養(yǎng)液中長期存在與繁殖的必須是同時含有HGPRT酶和TK酶的，如果融合細胞沒有保留人細胞中決定TK酶基因的染色體，融合細胞將無法存在與繁殖；如果融合細胞獲得了人細胞中決定TK酶基因的染色體，則可以在培養(yǎng)液中存活。從題中圖示信息可知，融合細胞必須含有人細胞中的17號染色體，這說明了人的17號染色體上含有TK酶的決定基因。在這一實驗過程中，HAT培養(yǎng)液不僅提供了融合細胞生存的條件，也起到了從混合細胞中篩選出同時含有HGPRT酶和TK酶的融合細胞的作用。