Question

【題目】（現(xiàn)代生物科技專題）

基因工程制藥是制藥行業(yè)突起的一支新軍,自重組人胰島素投放市場以來,利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)的藥物已有 60 多種。

（1）從人的胰島 B 細(xì)胞中提取 mRNA，通過_____________獲得_________________用于PCR 擴(kuò)增。

（2）PCR 擴(kuò)增可以在特定的儀器中加入模板 DNA、引物、____________以及_________等物質(zhì)后自動(dòng)完成。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成_______________，而造成引物自連。

（3）利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素，________（填“可以”或“不可以”）用大腸桿菌直接生產(chǎn)人的糖蛋白，原因是_________________。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄） cDNA dNTP（dATP、dTTP、dCTP、dGTP） Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶) 堿基互補(bǔ)配對(duì) 不可以 大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)表達(dá)的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工修飾

【解析】

PCR技術(shù)：

1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2、原理：DNA復(fù)制。

3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。

（1）從人的胰島 B 細(xì)胞中提取 mRNA，可以以mRNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄方法獲得cDNA，然后用于PCR擴(kuò)增目的基因。

（2）PCR 擴(kuò)增的條件需要：模板 DNA、引物、dNTP為原料、Taq酶等。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成堿基互補(bǔ)配對(duì)，而造成引物自連。

（3）大腸桿菌屬于原核生物，細(xì)胞內(nèi)沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，而人的糖蛋白的合成和加工過程中需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工與修飾作用，因此不可以用大腸桿菌直接生產(chǎn)出人的糖蛋白。