Question

下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的過程，圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉索抗性基因，BamHI、Bau3A I、Bst I、Haclll、Not I所指位點(diǎn)為限制酶的酶切位點(diǎn)，五種酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)在下表中。據(jù)圖表回答：

（1）將雙鏈DNA在中性鹽溶液中加熱，兩條單鏈分開，叫做DNA變性。變性后的DNA如果慢慢冷卻，又能恢復(fù)為雙鏈DNA，叫做退火。大量的如右圖中N元素標(biāo)記的DNA在變性后的退火過程中會(huì)形成                   種DNA。

（2）若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Not I酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越           。

（3）要將人乳蛋白基因插入載體，如果只允許用一種限制酶酶切載體和人乳鐵蛋白基因，應(yīng)選擇的限制酶是                   。

（4）篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含               的培養(yǎng)基上進(jìn)行。

（5）若從細(xì)胞中提取DNA和RNA，通過基因工程的方法，轉(zhuǎn)移到另一種細(xì)胞時(shí)，轉(zhuǎn)入DNA比轉(zhuǎn)入RNA要有優(yōu)勢(shì)，理由是                      

（6）供體牛的受精卵的性染色體組成為            。在胚胎移植過程中，供、受體牛選擇好后，要用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理的原因是             ，以保證移植的胚胎能夠繼續(xù)正常發(fā)育

（7）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用                     技術(shù)。

 

Answer 1

【答案】

（1）1種   （2）高        （3）Bau3A I      （4）氨芐青霉素

（5）轉(zhuǎn)入DNA不僅能合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，而且能夠復(fù)制并傳遞給下一代——4分

（6）XX   使供體和受體生理環(huán)境相同    （7）抗原---抗體分子雜交

【解析】（1）該DNA變性后形成兩條鏈：14N和15N。

（2）Not I識(shí)別的序列中G－C含量高，G－C之間氫鍵多，所以Not I酶切位點(diǎn)越多，熱穩(wěn)定性越高。

（3）Bau3A I能夠識(shí)別BamHI的識(shí)別序列，所以能同種切割載體和人乳鐵蛋白基因的酶是Bau3A I。

（4）重組質(zhì)粒中含有amp^R標(biāo)記基因，可利用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

（5）由于轉(zhuǎn)入DNA不僅能合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，而且能夠復(fù)制并傳遞給下一代，所以轉(zhuǎn)入DNA比轉(zhuǎn)入RNA要有優(yōu)勢(shì)。

（6）乳腺生物反應(yīng)器應(yīng)選擇母牛，其染色體組成是XX，為了使供體和受體生理環(huán)境相同，所以胚胎移植過程中應(yīng)用促性腺激素對(duì)供受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理。

（7）檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)可選擇抗原---抗體分子雜交技術(shù)。