Question

（10分）研究人員利用生物工程技術(shù)，探究豬bmp15基因在不同組織細(xì)胞中的特異性表達(dá)。該工程技術(shù)基本流程如下圖（EGFP基因控制合成增強(qiáng)型綠色熒光蛋白；過程②表示表達(dá)載體2成功導(dǎo)入各組織細(xì)胞）。請回答：

（1）過程①中，需利用 限制酶處理表達(dá)載體1。

（2）過程②中，常采用 技術(shù)將表達(dá)載體2成功導(dǎo)入受體細(xì)胞。

（3）培養(yǎng)受體細(xì)胞時(shí)，通常需在培養(yǎng)液中添加一定量的 ，以防污染。

（4）在實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，提取上述豬肌肉細(xì)胞的 （mRNA/DNA），利用標(biāo)記的EGFP基因作探針，進(jìn)行分子雜交，可進(jìn)一步探究豬bmp基因特異性表達(dá)的原因。

（5）據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測，豬bmp15基因在 細(xì)胞特異性表達(dá)。

Answer 1

（本小題10分，每空2分）

（1）XhoⅠ和Hind Ⅲ（2）顯微注射（3）抗生素（4）mRNA（5）豬卵巢

【解析】

試題分析：（1）表達(dá)載體需要用和切割目的基因的限制酶相同，保證有相同的粘性末端便于連接，由圖可知目的基因是用XhoⅠ和Hind Ⅲ酶切的，故表達(dá)載體也需要用XhoⅠ和Hind Ⅲ酶切。

（2）過程2中，將運(yùn)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常需要用顯微注射法。

（3）在培養(yǎng)受體細(xì)胞時(shí)，為了防止污染常需要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。為保證無毒還需要定期更換培養(yǎng)液。

（4）要檢測bmp基因是否特異性表達(dá)應(yīng)檢測是否存在該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA，故應(yīng)提取肌肉細(xì)胞的mRNA進(jìn)行分子雜交。

（5）據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知在豬卵巢中檢測到綠色熒光，說明該基因在豬卵巢進(jìn)行了特異性表達(dá)。

考點(diǎn)：本題考查基因工程相關(guān)知識，意在考察考生對知識點(diǎn)的識記理解掌握程度和對圖形分析能力。