Question

人和哺乳動(dòng)物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染．土壤中有些細(xì)菌含有脲酶，可通過(guò)降解尿素作為其生長(zhǎng)的氮源．現(xiàn)對(duì)土壤中的這類(lèi)細(xì)菌進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）分離培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)必須進(jìn)行無(wú)菌操作，包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無(wú)菌的，常用的滅菌方法有

 

、

 

和

 

．
（2）將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后接種培養(yǎng)．在稀釋土壤溶液的過(guò)程中每一步都要在

 

旁進(jìn)行操作．接種后的培養(yǎng)皿

 

于37℃的

 

中培養(yǎng)．
（3）用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于

 

培養(yǎng)基．若培養(yǎng)基中存在有分解尿素的細(xì)菌，其菌落周?chē)鷷?huì)出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的

 

使pH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源．變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力

 

．
（4）與全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)

 

．
A．多     B．少    C．相等     D．幾乎為零．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),以尿素為氮源，測(cè)定能生長(zhǎng)的細(xì)菌的數(shù)量

專(zhuān)題：

分析：實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌（如接種環(huán)）、干熱滅菌（如培養(yǎng)皿）、高壓蒸汽滅菌（如培養(yǎng)基）等．無(wú)菌操作要求在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作都在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以避免周?chē)�微生物的污染．微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法．稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．

解答： 解：（1）用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種工具和培養(yǎng)基等都必須是無(wú)菌的，常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌．
（2）采用稀釋涂布平板法將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)�然后接種培養(yǎng)；為避免雜菌污染，操作要在酒精燈火焰旁操作，為防止水蒸氣在皿蓋上凝結(jié)會(huì)產(chǎn)生水滴，培養(yǎng)皿需要倒置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．
（3）酚紅指示劑可用于鑒別微生物，所以含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基；尿素被分解成氨可使PH呈堿性，變色區(qū)域越大，說(shuō)明其分解能力越強(qiáng)．
（4）以尿素為氮源的培養(yǎng)基中菌落數(shù)少，因?yàn)槠渌�微生物不能在該環(huán)境中生存．
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌  灼燒滅菌  干熱滅菌 
（2）酒精燈火焰    倒置   恒溫培養(yǎng)箱
（3）鑒別  氨     越強(qiáng)
（4）B

點(diǎn)評(píng)：本題以脲酶為素材，考查微生物的分離和培養(yǎng)、以氮素為氮源測(cè)定能生長(zhǎng)的細(xì)菌的數(shù)量，要求考生識(shí)記無(wú)菌技術(shù)，特別是實(shí)驗(yàn)室常用的消毒和滅菌方法；掌握培養(yǎng)基的種類(lèi)，能應(yīng)用相應(yīng)的培養(yǎng)基對(duì)土壤中的含有脲酶的細(xì)菌進(jìn)行分離．