Question

19．多氯聯(lián)苯是一種對(duì)人體有很大危害的有機(jī)物質(zhì)，呈油狀液體，污染土壤后，很難清除．研究發(fā)現(xiàn)部分酵母菌具有分解多氯聯(lián)苯的作用，為消除這種污染，科研人員計(jì)劃從受污染的土壤中篩選出高效分解多氯聯(lián)苯的菌株．
（1）培養(yǎng)基中加入多氯聯(lián)苯作為唯一碳源，從功能上講該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）上述培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品稀釋（溶解）．
（3）對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行純化，一般操作方法有兩種，如圖是平板劃線法．
（4）將酵母菌溶液分別稀釋10、100、1000倍，每個(gè)濃度都接種3個(gè)平板，每個(gè)平板均接入0.1ml稀釋液．經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，平板上的菌落數(shù)如表所示：

	1	2	3
10	4	6	3
100	47	50	41
1000	420	478	413

據(jù)此可得出每升溶液中酵母菌活菌數(shù)為4.6×10⁷個(gè)/L．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品稀釋，接種到以多氯聯(lián)苯為唯一碳源的培養(yǎng)基上；只有能分解多氯聯(lián)苯的菌株才能在這樣的培養(yǎng)基中生存，因此從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌；篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時(shí)，應(yīng)將土壤樣品稀釋（溶解）．
（3）對(duì)初步提取到的菌株要進(jìn)行分離純化，一般操作方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖示是利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面．
（4）對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，一般選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，因此選擇稀釋100倍的三個(gè)培養(yǎng)基進(jìn)行計(jì)算，每升溶液中酵母菌活菌數(shù)=（47+50+41）÷3÷0.1×100×1000=4.6×10⁷個(gè)/L．
故答案為：
（1）唯一碳源   選擇培養(yǎng)基
（2）高壓蒸汽滅菌法   稀釋（溶解）
（3）純化    平板劃線
（4）4.6×10⁷

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的成分、培養(yǎng)基的類型及功能；識(shí)記接種微生物常用的兩種方法，掌握計(jì)數(shù)微生物的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．