Question

2．請根據(jù)人們利用轉基因生產(chǎn)多種藥物的技術，回答下列回題
（1）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時，構建基因表達載體中，含有人的胰島素基因及啟動子、終止子、標記基因復制原點等，其中啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，在轉化大腸桿菌時，常用Ca²⁺ 處理以使大腸桿菌成為感受態(tài)細胞，以利于表達載體進入．為了檢測胰島素基因是否轉錄，可用標記的胰島素基因作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為分子雜交 技術．常用抗原-抗體雜交 技術檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯．
（2）利用煙草生產(chǎn)人的干擾素時，可以采用農(nóng)桿菌轉化法，基因槍法和花粉管通道 將目的基因導入受體細胞．當采用農(nóng)桿菌轉化法時，所選用的載體一般是Ti質粒．轉化成功后，還需利用植物組織培養(yǎng) 技術將之培養(yǎng)成完整植株，該項技術的理論基礎是細胞的全能性，關鍵步驟是脫分化和再分化．
（3）利用轉基因羊生產(chǎn)人凝血因子時，常用顯微注射 技術將目的基因導入羊的受精卵，而后經(jīng)過一段時間的體外培養(yǎng)再利用胚胎移植 技術移入母體．若欲同時獲得多頭基因相同的轉基因羊，可以采用胚胎分割 技術．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因表達載體的組成包括目的基因（胰島素基因）、啟動子、終止子、標記基因、復制原點等，其中啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位；將目的基因導入微生物細胞中，常用感受態(tài)轉化法，即用Ca²⁺處理以使大腸桿菌成為感受態(tài)細胞，以利于表達載體進入．為了檢測目的基因是否轉錄，可用分子雜交技術，即用標記的目的基因作探針與mRNA雜交．檢測目的基因是否翻譯形成相應的蛋白質，常用抗原-抗體雜交技術．
（2）將目的基因導入植物細胞可采用農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管法；當采用農(nóng)桿菌轉化法時，所選用的載體一般是Ti質粒．將含有目的基因的轉基因受體細胞培育成轉基因植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術，該技術包括脫分化和再分化兩個過程，其原理是植物細胞具有全能性．
（3）利用轉基因羊生產(chǎn)人凝血因子時，常用顯微注射技術將目的基因導入羊的受精卵，而后經(jīng)過一段時間的體外培養(yǎng)再利用胚胎移植技術移入母體．由于來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質，因此若欲同時獲得多頭基因相同的轉基因羊，可以采用胚胎分割技術．
故答案為：
（1）終止子    標記基因    RNA聚合酶    Ca²⁺   感受態(tài)      胰島素基因    分子雜交    抗原-抗體雜交
（2）基因槍    花粉管通道    Ti質粒    植物組織培養(yǎng)    細胞的全能性     脫分化和再分化
（3）顯微注射     受精卵     胚胎移植    胚胎分割

點評 本題綜合考查基因工程和細胞工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題；識記植物組織培養(yǎng)的原理、過程及條件；識記胚胎移植的基本程序及胚胎分割技術的特點，能結合所學的知識準確答題．