Question

5．科學(xué)家從病死的家禽和候鳥體內(nèi)分離到了H5N1禽流感病毒，用以生產(chǎn)可以預(yù)防和治療禽流感的抗體，下圖為單克隆抗體制備過程示意圖，圖中A～F分別表示生物技術(shù)或細(xì)胞名稱，請回答有關(guān)問題：
（1）若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自的感染H5N1病毒的動物或人細(xì)胞，C過程不同于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的常用誘導(dǎo)因素是滅活的病毒．
（2）假設(shè)僅考慮某兩個細(xì)胞的融合，則可能形成3種類型的D細(xì)胞，因此需用選擇性培養(yǎng)基篩選出既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生特異性抗體（填特點(diǎn)）的E細(xì)胞用于培養(yǎng)．
（3）將篩選出的E細(xì)胞注射到小鼠的腹腔內(nèi)增殖，即可從小鼠的腹水中提取出大量的單克隆抗體．
（4）在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液中必須通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增多，就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制，需要用胰蛋白酶等處理使細(xì)胞從瓶壁上分離下來．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
2、兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．

解答 解：（1）單克隆抗體制備是將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自感染H₅N₁禽流感病毒的動物或人的細(xì)胞．C過程為動物細(xì)胞融合，利用的誘導(dǎo)方法有物理法、化學(xué)法、生物法（滅活的病毒），而誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法有物理法和化學(xué)法．
（2）假設(shè)僅考慮某兩個細(xì)胞的融合，則可能形成雜交瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、效應(yīng)B細(xì)胞自身融合細(xì)胞3種類型的D細(xì)胞，因此需用選擇性培養(yǎng)基篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞用于培養(yǎng)．
（3）將篩選出的E細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔內(nèi)增殖，即可從小鼠的腹水中提取出大量的單克隆抗體．
（4）在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液中必須通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增多，就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制，需要用胰蛋白酶等處理使細(xì)胞從瓶壁上分離下來．
故答案為：
（1）感染H5N1病毒的動物或人　   滅活的病毒
（2）選擇性　   既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生特異性抗體
（3）腹腔       腹水
（4）維持培養(yǎng)液的pH  　接觸抑制

點(diǎn)評 本題以單克隆抗體的制備圖解為載體，考查了多項生物工程技術(shù)，具有一定的綜合性．考生要識記動物細(xì)胞融合的方法；識記單克隆抗體制備的步驟；識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和特點(diǎn)．