Question

【題目】下面是利用基因工程、胚胎工程等技術(shù)以牛為對象進(jìn)行的研究工作，請分析回答問題：

（1）基因工程的基本操作流程中，當(dāng)獲取目的基因后，在將其導(dǎo)入受體細(xì)胞前需要進(jìn)行一個 重要的操作步驟，即構(gòu)建______________，該步驟使用的兩種工具酶分別是______________。一個完整的基因表達(dá)載體中______________是RNA聚合酶識別、結(jié)合的部位。

（2）從公牛體內(nèi)采集的精子需經(jīng)過______________處理，才能在體外與成熟卵細(xì)胞結(jié)合形成 受精卵。將目的基因?qū)�入受精卵中，受精卵在體外培養(yǎng)至早期胚胎，再移植到母牛子宮中。進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢是可以________________________________________________________。

（3）在早期胚胎時期取滋養(yǎng)層細(xì)胞通過______________方法進(jìn)行DNA檢測，來判斷目的基因是否導(dǎo)入細(xì)胞中。外源基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可從轉(zhuǎn)基因牛中提取蛋白質(zhì)，并用相應(yīng)的抗體進(jìn)行“_____________”雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，則表明牛體內(nèi)的外源基因______________（填“已表達(dá)”或“未表達(dá)”）。

Answer 1

【答案】 基因表達(dá)載體 限制酶、DNA連接酶 啟動子 獲能 充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，大大縮短了供體本身的繁殖周期 DNA分子雜交 抗原一抗體 巳表達(dá)

【解析】試題分析：本題組要考查了基因工程的原理和技術(shù)、胚胎移植等技術(shù)，通過分析基因工程技術(shù)的基本步驟及胚胎移植優(yōu)點，再結(jié)合題中問題進(jìn)行解答。

（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測與表達(dá)，其中基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程中最核心的步驟，構(gòu)建基因表達(dá)載體的步驟中，首先需要限制酶切割外源DNA分子和運載體，其次還需要DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，其中啟動子是RNA聚合酶識別、結(jié)合的部位。

（2）進(jìn)行體外受精前，需要對獲得的精子進(jìn)行獲能處理，使精子具有受精的能力；進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力，大大縮短了供體本身的繁殖周期。

（3）檢測外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞用DNA分子雜交技術(shù)；檢測是否成功表達(dá)蛋白質(zhì)采用抗原-抗體雜交技術(shù)，即從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應(yīng)的（單克隆）抗體與提取的蛋白質(zhì)者進(jìn)行雜交，若能雜交，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因已表達(dá)。