Question

【題目】家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力。將干擾素基因導入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。請回答下列問題：

（1）進行轉基因操作前，需將獲得的幼蠶組織先_____________，并用_____________酶短時處理以便獲得單個細胞。

（2）在培養(yǎng)獲得的單個細胞時，為避免雜菌污染，除對培養(yǎng)液和用具進行無菌處理以外，還應在培養(yǎng)液中添加一定的_______________。培養(yǎng)過程中，發(fā)現(xiàn)貼壁細胞分裂生長到相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，此現(xiàn)象稱為_____________________。

（3）將干擾素基因導入培養(yǎng)的家蠶細胞時，需要運載體協(xié)助，而運載體一般不選擇_________(噬菌體、昆蟲病毒)，原因是________________________________。

（4）導入成功后，若要檢測干擾素基因在家蠶細胞中是否成功表達，可以采用的方法是___________。

Answer 1

【答案】剪碎 胰蛋白酶 抗生素 接觸抑制 噬菌體 噬菌體的宿主細胞是細菌而不是家蠶 抗原-抗體雜交技術

【解析】

本題考查細胞工程、基因工程，考查對動物細胞培養(yǎng)技術、基因工程操作程序的理解和識記。根據(jù)基因工程中受體細胞的種類可選擇適宜的運載體。

（1）將獲得的幼蠶組織剪碎，并用胰蛋白酶短時處理，水解細胞間的膠原蛋白，可以制備單細胞懸液。

（2）在動物細胞培養(yǎng)過程中，為避免雜菌污染，除對培養(yǎng)液和用具進行無菌處理以外，還應在培養(yǎng)液中添加一定的抗生素，抑制雜菌生長。培養(yǎng)過程中，細胞具有貼壁生長、接觸抑制的特點。

（3）噬菌體只能侵染細菌，將干擾素基因導入培養(yǎng)的家蠶細胞時，應選擇昆蟲病毒，而不能選擇噬菌體。

（4）檢測干擾素基因在家蠶細胞中是否成功表達，可制備家蠶細胞勻漿，用抗原—抗體雜交方法，檢測是否有雜交帶出現(xiàn)。