Question

1．下列是利用植物生產(chǎn)抗艾滋病病毒的藥物過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）獲取目的基因的常用方法是基因文庫(kù)中獲取、人工合成和PCR技術(shù)擴(kuò)增．若用PCR技術(shù)擴(kuò)增抗旱基因，需要用到的酶是熱穩(wěn)定性DNA聚合酶．
（2）圖中構(gòu)成B的組件除抗旱基因、啟動(dòng)子、終止子外，還有標(biāo)記基因，在構(gòu)建此結(jié)構(gòu)時(shí)A基因和Ti質(zhì)粒結(jié)合的部位是T-DNA片段內(nèi)．
（3）圖中③目的基因?qū)�入煙草�?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此之外導(dǎo)入植物受體細(xì)胞的方法還可以是花粉管通道法和基因槍法．
（4）含有目的基因的受體細(xì)胞培養(yǎng)成煙草植株的培養(yǎng)基中，除加入一定的營(yíng)養(yǎng)成分外，還需要添加植物激素，同時(shí)除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的關(guān)鍵是無(wú)菌操作．
（5）與該培養(yǎng)過(guò)程所用培養(yǎng)基相比，用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液除含有水分，無(wú)機(jī)鹽、糖類、維生素以及氨基酸之外，還需要添加血清、血漿．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等．標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．例：用蟲(chóng)食用棉花，觀察其存活情況，來(lái)鑒定棉花是否具有抗蟲(chóng)特性．
2、圖示過(guò)程為基因工程流程，①是構(gòu)建基因表達(dá)載體，②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，③目的基因?qū)�入煙草�?xì)胞，然后經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得完整植株個(gè)體．

解答 解：（1）獲取目的基因的常用方法有基因文庫(kù)中獲取、人工合成和PCR技術(shù)擴(kuò)增等，其中PCR技術(shù)需要用熱穩(wěn)定性DNA聚合酶．
（2）圖中B為重組質(zhì)粒，其結(jié)構(gòu)包括抗旱基因（目的基因）、啟動(dòng)子、終止子外、標(biāo)記基因，在構(gòu)建此結(jié)構(gòu)時(shí)A基因和Ti質(zhì)粒結(jié)合的部位是T-DNA片段內(nèi)．
（3）圖中③目的基因?qū)�入煙草�?xì)胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，還可以用花粉管通道法和基因槍法．
（4）決定脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類及比例，因此在培養(yǎng)過(guò)程中，除添加必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還需要向培養(yǎng)基中添加植物激素；植物組織培養(yǎng)時(shí)除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的另一關(guān)鍵是無(wú)菌操作．
（5）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分：水分、無(wú)機(jī)鹽、糖類、維生素以及氨基酸等之外，還要加入動(dòng)物血清．
故答案為：
（1）基因文庫(kù)中獲取   人工合成   熱穩(wěn)定性DNA聚合酶
（2）標(biāo)記基因   T-DNA片段內(nèi)
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法  花粉管通道法和基因槍法
（4）植物激素    無(wú)菌操作
（5）血清、血漿

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或的能力．要注意，基因表達(dá)載體的構(gòu)建是在生物體外完成的．PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)．通過(guò)這一技術(shù)，可以獲取大量的目的基因．農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，而對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力．