Question

【題目】受損傷的馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)酚氧化酶（PPO）和底物（酚類物質(zhì)）直接接觸，引起馬鈴薯的褐變，為探究溫度對(duì)PPO活性的影響，實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：

（1）PPO粗提液的提取在________（填“低溫”或“高溫”）條件下將新鮮馬鈴薯用蒸餾水洗凈、去皮，取20g樣品放入含50mL磷酸緩沖液（pH值為5.5）的研缽中，同時(shí)加入少量石英砂，研磨、離心、上清液即為PPO的粗提液，加緩沖液研磨的目的是________

（2）不同溫度下PPO活性的測(cè)定

步驟順序	試管1	試管2	試管3	試管4	試管5	試管6	試管7	試管8
PPO粗提液	2mL		2mL		2mL		2mL
酚類底物		2mL		2mL		2mL		2mL
反應(yīng)	混合振蕩		混合振蕩		混合振蕩		混合振蕩
溫度預(yù)處理	（5min）0℃		15℃		30℃		45℃
保溫時(shí)間	5min		5min		5min		5min
記錄結(jié)果	+		++++		++++		++

（注：反應(yīng)底物充足；實(shí)驗(yàn)結(jié)果中“+”越多褐色越深）

①實(shí)驗(yàn)步驟順序有不妥之處，請(qǐng)改正________。

②實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性，從酶的特性分析其原因是________。

③為進(jìn)一步探究PPO最適溫度，應(yīng)在________范圍內(nèi)設(shè)置溫度梯度。

（3）I．在溫度30℃的條件下，取等量提取液分別加到四支盛有等量過(guò)氧化氫溶液、pH分別為3、5、7、9的試管中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)每一支試管都產(chǎn)生氣體。請(qǐng)回答：

①該實(shí)驗(yàn)的課題是：________。

②各實(shí)驗(yàn)組均在30℃下進(jìn)行的原因是：a________；b_______。

Ⅱ．將加入4支試管中的馬鈴薯提取液的量減半，重復(fù)實(shí)驗(yàn)I．分別測(cè)定實(shí)驗(yàn)I、Ⅱ中過(guò)氧化氫在相同時(shí)間內(nèi)的含量變化，繪制成如圖所示曲線，請(qǐng)回答：曲線A是實(shí)驗(yàn)________（選填I或Ⅱ）的結(jié)果。據(jù)圖能否說(shuō)明實(shí)驗(yàn)I、Ⅱ中酶活性不同？_______。

Answer 1

【答案】低溫 保持PPO的活性（防止PPO失活） “反應(yīng)”步驟改在“溫度預(yù)處理”之后 在酶的最適溫度前后，可以有相同的催化效率 15℃30℃ 探究不同pH對(duì)過(guò)氧化氫酶活性的影響 30℃是過(guò)氧化氫酶作用的適宜溫度 排除溫度變化（無(wú)關(guān)變量）對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 Ⅱ 不能

【解析】

影響酶促反應(yīng)速率的因素主要有：溫度、pH、底物濃度和酶濃度．在底物的量充足時(shí)，隨著酶濃度的增加，酶促反應(yīng)速率逐漸加快，即縮短到達(dá)化學(xué)反應(yīng)平衡點(diǎn)的時(shí)間，但酶不會(huì)改變化學(xué)反應(yīng)的平衡點(diǎn)。

（1）提取酶時(shí)，都要求低溫，防止酶活性喪失，加緩沖液作用：使溶液pH值保持相對(duì)穩(wěn)定，保持PPO的活性。

⑵① “溫度預(yù)處理”之后進(jìn)行反應(yīng)，才能保證各個(gè)試管是在不同溫度下測(cè)定PPO活性。

②15℃和30℃溫度條件，PPO具有相同的活性原因：在酶的最適溫度前后，可以有相同的催化效率 。

③15℃～30℃范圍內(nèi)，PPO活性較高，所以在該溫度范圍內(nèi)，有PPO的最適溫度。

(3)①該題自變量是不同pH值，因變量為酶活性，所以實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖翘骄坎煌琾H對(duì)過(guò)氧化氫酶活性的影響。

②30℃是過(guò)氧化氫酶的適宜溫度，恒溫是排除溫度變化（無(wú)關(guān)變量）對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。

(4) A、B曲線相同時(shí)間情況下，底物剩余量最多，說(shuō)明酶量更少，選擇Ⅱ組實(shí)驗(yàn)。

(5)該實(shí)驗(yàn)不能說(shuō)明酶活性在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中的變化情況，酶量的大小沒(méi)有影響酶的最適pH值。