Question

（9分）在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里，一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲。這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補充每天必需的維生素A，由于含有可以生成維生素A的β一胡蘿卜素，它呈現(xiàn)金黃色澤，故稱“金色大米”�！敖鹕�大米”的培育流程如圖所示。請回答下列問題.(已知酶I的識別序列和切點是 -G↓GATCC-，酶II的識別序列和切點是-↓GATC-)

（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是 。通過該操作形成了圖中的c，它的構成至少包括目的基因、標記基因、復制原點和 等。

（2）在研究過程中獲取了目的基因后采用 技術進行擴增，在構建c的過程中目的基因用 (限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ)進行了切割；檢驗重組載體導入能否成功需要利用 作為標記基因。

（3）過程d通常采用 方法，過程e運用了植物組織培養(yǎng)技術獲得符合要求的個體。在該技術應用的過程中，關鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導植物細胞進行 和 。

（4）若希望該轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的“金色大米”含維生素A含量更高、效果更好，則需要通過 工程手段對合成維生素A的相關目的基因進行設計。

Answer 1

（1）基因表達載體的構建 啟動子、終止子 （2）PCR 限制酶Ⅱ 基因I

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 脫分化 再分化 （4）蛋白質(zhì)

【解析】

試題分析：(1)基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建。構建成的基因表達載體可用圖中c表示,其結構中至少包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因。

(2)擴增目的基因應采用PCR技術。據(jù)圖可知,限制酶Ⅱ的識別序列中包含了限制酶Ⅰ的識別序列,若使用限制酶Ⅰ進行切割,則基因Ⅰ和基因Ⅱ都會被破壞,因此應使用限制酶Ⅱ進行切割。此時基因Ⅰ結構完整,可作為標記基因。

(3)將目的基因?qū)�入植物細�?即過程d)通常采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,將受體細胞培育為完整植株需用植物組織培養(yǎng)技術,該技術的核心是脫分化和再分化。

(4)對自然界原有基因的修飾、改造需通過蛋白質(zhì)工程。

考點：本題考查基因工程的應用，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡的能力。