Question

此表為幾種限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的序列和切割的位點(diǎn)．如圖，已知某DNA在目的基因的兩端1、2、3、4四處有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位點(diǎn)．現(xiàn)用PstⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時(shí)切割該DNA片段（假設(shè)所用的酶均可將識(shí)別位點(diǎn)完全切開(kāi)），下列各種酶切位點(diǎn)情況中，可以防止酶切后單個(gè)含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀的是（　�。�

限制酶	BamHⅠ	EcoRⅠ	PstⅠ
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)

• A、1 為EcoRⅠ，2為BamHⅠ，3為EcoRⅠ，4為PstⅠ
• B、1 為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為EcoRⅠ，4為PstⅠ
• C、1 為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為PstⅠ，4為EcoRⅠ
• D、1 為EcoRⅠ，2為PstⅠ，3為PstⅠ，4為BamHⅠ

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：由于限制酶具有特異性，一種限制酶只能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并形成特定的黏性末端．題干中提出“為防止酶切后單個(gè)含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀”，即要求目的基因兩側(cè)的黏性末端不同，因此一般選擇不同的限制酶進(jìn)行切割．

解答： 解：A、如果1為EcoRⅠ，2為BamHⅠ，3為EcoRⅠ，4為PstⅠ，用PstⅠ和EcoRⅠ兩種酶同時(shí)切割該DNA片段，則切割后含有目的基因的片段兩側(cè)有相同的黏性末端（1處和3處），會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化，A錯(cuò)誤；
B、如果2為EcoRⅠ，3為EcoRⅠ則切割后含有目的基因的片段兩側(cè)有相同的黏性末端（2處和3處），會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化，B錯(cuò)誤；
C、如果1為BamHⅠ，2為EcoRⅠ，3為PstⅠ，4為EcoRⅠ，則切割后含有目的基因的片段兩側(cè)有不同的黏性末端（2處和3處），可以防止酶切后單個(gè)含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀，C正確；
D、如果2為PstⅠ，3為PstⅠ，則切割后含有目的基因的片段兩側(cè)有相同的黏性末端（2處和3處），會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化，D錯(cuò)誤．
故選：C．

點(diǎn)評(píng)：本題考查了限制酶的特點(diǎn)及應(yīng)用，在基因工程中，一般為防止質(zhì)�；蚰康幕�因自身環(huán)化，一般選擇不同的限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，以形成不同的黏性末端．