Question

12．如圖是利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)蘇云金桿菌（Bt）毒素蛋白基因植物的過(guò)程示意圖（amp^r為抗氨芐青霉素基因），表格內(nèi)是3種相關(guān)限制酶的識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)示意圖．

（1）圖1過(guò)程②是基因工程基本步驟，稱為將目的基因與運(yùn)載體重組．
（2）運(yùn)用HindⅢ與BamHⅠ酶切目的基因與質(zhì)粒，并加入DNA連接酶來(lái)構(gòu)建重組質(zhì)粒的方法的缺點(diǎn)是該種方法會(huì)產(chǎn)生4種重組質(zhì)粒，不利于篩選．為了改善上述問(wèn)題，可以改用BstⅠ或BamHⅠ酶．
（3）本實(shí)驗(yàn)選用的運(yùn)載體是圖中的pBR質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒，他們的基本單位是脫氧核苷酸．
（4）下列關(guān)于質(zhì)粒運(yùn)載體的說(shuō)法正確的是ACDE（多選）．
A．質(zhì)粒運(yùn)載體作用之一是防止目的基因被核酸酶降解
B．質(zhì)粒運(yùn)載體只能在與目的基因重組后進(jìn)入細(xì)胞
C．目的基因插人質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒運(yùn)載體的復(fù)制和表達(dá)
D．③中Ti質(zhì)粒的T-DNA片段可以協(xié)助目的基因?qū)�入植物�?xì)胞
E．沒(méi)有限制酶就無(wú)法使用質(zhì)粒運(yùn)載體．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示是利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)蘇云金桿菌（Bt）毒素蛋白基因植物的過(guò)程示意圖，其中①表示目的基因，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，③表示將目的基因?qū)�入農(nóng)桿菌細(xì)胞；④表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的導(dǎo)入植物細(xì)胞．

解答 解：（1）圖1②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程．
（2）運(yùn)用HindⅢ與BamHI酶切目的基因與質(zhì)粒，并加入DNA連接酶來(lái)構(gòu)建重組質(zhì)粒的方法會(huì)產(chǎn)生4種重組質(zhì)粒，不利于篩選，為了改善上述問(wèn)題，可以改用BstI或BamHI酶．
（3）由圖可知，本實(shí)驗(yàn)選用的運(yùn)載體是pBR質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒，它們都是雙鏈環(huán)狀DNA分子，因此基本單位是脫氧核苷酸．
（4）A、質(zhì)粒運(yùn)載體作用之一是防止目的基因被核酸酶降解，A正確；
B、質(zhì)粒運(yùn)載體本身可以進(jìn)入細(xì)胞，不一定要與目的基因重組，B錯(cuò)誤；
C、目的基因插人質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒運(yùn)載體的復(fù)制和表達(dá)，C正確；
D、Ti質(zhì)粒的T-DNA片段可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此可以協(xié)助目的基因?qū)�入植物�?xì)胞，D正確；
E、作為運(yùn)載體要有限制酶的切割位點(diǎn)，因此沒(méi)有限制酶就無(wú)法使用質(zhì)粒運(yùn)載體，E正確．
故選：ACDE．
故答案為：
（1）將目的基因與運(yùn)載體重組
（2）該種方法會(huì)產(chǎn)生4種重組質(zhì)粒，不利于篩選  BstⅠ或BamHⅠ
（3）pBR質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒 脫氧核苷酸
（4）ACDE

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)蘇云金桿菌（Bt）毒素蛋白基因植物的過(guò)程示意圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，能正確分析題圖，同時(shí)能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．