Question

【題目】Ⅰ.苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)設(shè)計實驗從處理廢水的活性污泥中分離篩選苯酚降解高效菌株，請回答下列問題：

（1）苯酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HP04、MgS04、苯酚和水，其中可作為碳源的有__________。

（2）將采集到的樣品進行選擇培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸____________，以達到增加苯酚降解菌濃度的目的。

（3）下圖為平板劃線法示意圖，在圖中____________（填圖中序號）區(qū)域更易獲得單菌落。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、無機鹽及各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加______________________。

（4）采用比色測定法（使用苯酚顯色劑）檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應(yīng)，下表中25號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為______________________。

試管號	1	2	3	4	5	6
苯酚濃度（mg/L）	0					1

Ⅱ.番茄紅素是一種類胡蘿卜素（脂溶性），不溶于水，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，主要存在于番茄、西瓜等植物中。

（1）提取番茄紅素常用____________（填“乙醇”或“石油醚”）萃取，理由是____________________。

（2）番茄紅素提取實驗的流程為：植物→粉碎→①→萃取→②→濃縮→番茄紅素，其中，①表示________，②表示_____________。

（3）該實驗操作過程中萃取環(huán)節(jié)采用水浴加熱的原因__________________________。

（4）番茄紅素粗品的鑒定方法是__________________________。

Answer 1

【答案】 蛋白胨、苯酚 增加 ③ 瓊脂（凝固劑） 0.2 0.4 0.6 0.8 石油醚 石油醚為水不溶性有機溶劑且具有較高的沸點 干燥 過濾 石油醚易燃，直接使用明火加熱容易引起燃燒 紙層析法

【解析】試題分析：本題考查微生物的培養(yǎng)、分離與植物成分的提取�？疾閷ε囵B(yǎng)基成分、微生物分離方法、色素提取、鑒定方法的理解和識記。解答此題，可借鑒葉綠體中色素鑒定方法鑒定番茄紅素粗品。

Ⅰ.（1）培養(yǎng)基中的蛋白胨、苯酚均含有碳元素，可作為微生物培養(yǎng)的碳源。

（2）選擇培養(yǎng)的目的是增加苯酚降解菌濃度，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸增加。

（3）平板劃線法在劃線的結(jié)尾③處菌體密度最低，更易獲得單菌落。平板培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，制備時必須添加瓊脂（凝固劑）。

（4）根據(jù)1號～6號試管濃度成等梯度變化，且１號、6號試管濃度分別為0、1，可判斷25號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為0.2 0.4 0.6 0.8。

Ⅱ.（1）提取番茄紅素可用萃取法，萃取過程中需要較高的溫度，石油醚為水不溶性有機溶劑且具有較高的沸點，而酒精可與水混溶，因此常用石油醚作為萃取劑。

（2）植物粉碎后應(yīng)干燥，以利于有機溶劑的萃取；萃取后可過濾除去殘渣。

（3）石油醚易燃，直接使用明火加熱容易引起燃燒，因此萃取環(huán)節(jié)采用水浴加熱。

（4）番茄紅素粗品可用紙層析法鑒定。