Question

10．人們常采用生物工程技術(shù)以獲得需要的生物新品種或新產(chǎn)品．回答下列問題：
（1）培育轉(zhuǎn)基因生物時(shí)常需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，該過程中需耍的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶，在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，目的基因的首端必須含有啟動(dòng)子，將基因表達(dá)載體導(dǎo)入到受體細(xì)胞中常用的方法是顯微注射法．
（2）若要培育出多頭相同的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，需要對培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割后轉(zhuǎn)入到經(jīng)同期發(fā)情（促性腺激素）處理的受體動(dòng)物體內(nèi)．
（3）在抗蟲棉培育過程中，采用愈傷組織細(xì)胞作為受體細(xì)胞，與采用葉肉細(xì)胞相比較，其優(yōu)點(diǎn)是全能性高，將抗蟲基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞后，還需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)才能獲得抗蟲棉植株．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體，其次需要DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA．在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，目的基因的首端必須含有啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)，能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程；將基因表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法．
（2）胚胎分割時(shí)應(yīng)該選擇形態(tài)正常、發(fā)育良好的桑椹胚或囊胚．胚胎移植前，需對受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境．
（3）愈傷組織細(xì)胞是外植體經(jīng)過脫分化過程形成的，以其作為受體細(xì)胞，與采用葉肉細(xì)胞相比較，其優(yōu)點(diǎn)是全能性高；將轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶     啟動(dòng)子    顯微注射法
（2）桑椹胚或囊胚       同期發(fā)情（促性腺激素）
（3）全能性高       植物組織培養(yǎng)

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．