Question

回答下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的問題．
（1）為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作．
①該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量．在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是

 

；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37．據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為

 

．實(shí)驗(yàn)中的接種工具稱為

 

．
②該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌．操作時(shí)，接種環(huán)通過

 

滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線．這樣做的目的是

 

．
（2）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見下表：“+”表示有，“-”表示無）．
（注：在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時(shí)，CR可與纖維素形成紅色復(fù)合物．）

	酵母膏	無機(jī)鹽	淀粉	纖維素粉	瓊脂	CR溶液	水
培養(yǎng)基甲	+	+	+	+	-	+	+
培養(yǎng)基乙	+	+	+	-	+	+	+

據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲

 

（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是

 

；培養(yǎng)基乙

 

（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：土壤中能分解纖維素的微生物及其應(yīng)用價(jià)值,微生物的分離和培養(yǎng)

專題：

分析：1、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過程中的無菌技術(shù)包括消毒和滅菌．
2、計(jì)算樣品菌液中的菌株數(shù)時(shí)，每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表樣品菌液的稀釋倍數(shù)．
3、分析表格可知，培養(yǎng)基甲為液體培養(yǎng)基，不能用于分離和鑒別纖維素分解菌；纖維素分解菌鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，而培養(yǎng)基乙沒有纖維素，因此也不能用于分離和鑒別纖維素分解菌．

解答： 解：（1）①微生物培養(yǎng)過程應(yīng)該進(jìn)行無菌操作，配制的培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量，在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；由題意知，平板上生長的平均菌落數(shù)=（39+38+37）÷3=38個(gè)，則1ml水樣中的菌落數(shù)=（C÷V）×M=（38÷0.1）×100=3.8×10⁴個(gè)，每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×10⁴×10³=3.8×10⁷個(gè)；實(shí)驗(yàn)中的接種工具稱為無菌玻璃刮鏟（也叫涂布器）．
②該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)的接種環(huán)要通過灼燒滅菌；平板劃線法分離菌株時(shí)，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開始劃線，其目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落．
（2）由以上分析知，培養(yǎng)基甲為液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基不能分離單菌落，所以培養(yǎng)基甲不能用于分離和鑒別纖維素分解菌；用于纖維素分解菌鑒別的培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，而培養(yǎng)基乙沒有纖維素，不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌，因此培養(yǎng)基乙也不能用于分離和鑒別纖維素分解菌．
故答案為：
（1）①檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格       3.8×10⁷    無菌玻璃刮鏟（涂布器）    灼燒     ②將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落
（2）不能    液體培養(yǎng)基不能分離單菌落     不能     乙培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌

點(diǎn)評(píng)：本題考查微生物培養(yǎng)中的無菌技術(shù)、微生物的分離和計(jì)數(shù)、培養(yǎng)基的分類和作用的知識(shí)，對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記和理解是解題的關(guān)鍵．