綠色熒光蛋白基因(GFP)被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細胞和組織內(nèi)基因表達及蛋白位的理想標記。請根據(jù)圖表回答下列問題。
(1)若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是T↓TCGA，N端伸出的核苷酸的堿基序列是C↑TGCA，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用限制酶_____，再對_____進行切割。
(2)若對符合設(shè)計要求的重級質(zhì)粒A進行酶切，假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開，請根據(jù)圖表中的信息分析，若采用BamH1和Pst1酶切，可得到________種DNA片段。
(3)檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體DNA上，可在熒光顯微鏡下觀察GFP的表達，圖中綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的轉(zhuǎn)基因操作中的GFP既是______也是_____。
(4)綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程中涉及到多項現(xiàn)代生物技術(shù)，圖中⑤⑥⑦過程屬于_________，而⑨過程屬于____________。
(1)HindIII和PstⅠ    Ti質(zhì)粒
(2)2
(3)目的基因    標記基因
(4)核移植   胚胎移植
練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目：高中生物 來源： 題型：

30.（18分）斑馬魚的酶D由17號染色體上的D基因編碼。具體純合突變基因（dd）的斑馬魚胚胎會發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白（G）基因整合到斑馬魚17號染色體上，

帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對應(yīng)位點表示為g。用個體

M和N進行如下雜交實驗

（1）在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炛�，將G基因與質(zhì)粒重組，需要的兩類酶是       和       。將

重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚           中,整合到染色體上的G基因               后，

使胚胎發(fā)出綠色熒光。

（2）根據(jù)上述雜交實驗推測

代M的基因型是            （選填選項前的符號）

a. DDGG      b. DDGg      c. DdGG         d. DdGg

（3）雜交后，出現(xiàn)紅·綠熒光（既有紅色又有綠色熒光）胚胎的原因是親代           （填

“M”或“N”）的初級精（卵）母細胞在減數(shù)分裂過程中，同源染色體的           發(fā)生了交換，導(dǎo)致染色體上的基因重組。通過記錄子代中紅·綠熒光胚胎數(shù)量與胚胎總數(shù)，可計算得到該親本產(chǎn)生的重組配子占其全部配子的比例，算式為            

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科目：高中生物 來源：2010年吉林省吉林市毓文中學高二下學期期中考試生物卷 題型：綜合題

（18分）2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍色或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：
（1）圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—,限制酶II的識別序列和切點是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶I的一個切點，在目的基因的兩側(cè)各有一個酶II的切點。
①請畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
③在DNA連接酶作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來＿＿＿＿，理由是：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也是最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）從分子水平上，檢測綠色熒光蛋白基因是否插入到豬胎兒成纖維染色體的DNA上，檢測方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，檢測綠色熒光蛋白基因是否表達，檢測方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為表達載體上的＿＿＿＿＿＿＿＿。獲得的轉(zhuǎn)基因豬，可以解決的醫(yī)學難題是可以避免＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

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科目：高中生物 來源：2010年廣東省汕頭市金山中學高二下學期期中試題生物卷 題型：綜合題

2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學的種豬場自然分娩產(chǎn)出，這標志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：

（1）圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。若限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點是一G↓GATCC一，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC一。在質(zhì)粒上有酶I的一個切點，在目的基因的兩側(cè)各有1個酶Ⅱ的切點。
①請畫出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。
②在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來? ＿＿＿＿＿。理由是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）GFP基因與目的基因一起構(gòu)建到載體上不影響目的基因的表達，也不影響由目的基因控制合成的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能,且對細胞無毒性作用，因此GFP基因可以運用作為基因表達載體上的＿＿＿＿＿＿。
（3）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。然后還要通過＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿技術(shù)來檢測綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體DNA上。
（4）為了獲得更多的豬卵母細胞，可通過對母豬注射＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的方法，做超數(shù)排卵處理，并將所采集到的卵母細胞在體外培養(yǎng)到＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿期即可通過顯微操作將其細胞核去除。
（5）早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素、激素、＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿等物質(zhì)。
（6）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程屬于＿＿＿＿＿＿生殖。目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是：＿＿＿＿＿＿(用數(shù)字表示)。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②藍色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計
③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達出藍色熒光蛋白

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科目：高中生物 來源：2014學年高一生物人教版必修二第6章《從雜交育種到基因工程》練習卷B（解析版） 題型：綜合題

斑馬魚的酶D由17號染色體上的D基因編碼。具體純合突變基因（dd）的斑馬魚胚胎會發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白（G）基因整合到斑馬魚17號染色體上，帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對應(yīng)位點表示為g。用個體M和N進行如下雜交實驗

⑴在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒炛校瑢?/span>G基因與質(zhì)粒重組，需要的兩類酶是??????? 和???????? 。將重組質(zhì)粒顯微注射到斑馬魚受精卵中,整合到染色體上的G基因?????????????? 表達后，使胚胎發(fā)出綠色熒光。

根據(jù)上述雜交實驗推測：

⑵M的基因型是??????????? （選填選項前的符號）

a. DDGG???????? b. DDgg??????? c. Ddgg?????? d. DdGg

⑶雜交后，出現(xiàn)紅·綠熒光（既有紅色又有綠色熒光）胚胎的原因是親代??????? （填“M”或“N”）的初級精（卵）母細胞在減數(shù)分裂過程中， 同源染色體的__________發(fā)生了交換，導(dǎo)致染色體上的基因重組。

 

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科目：高中生物 來源：2010年吉林省吉林市高二下學期期中考試生物卷 題型：綜合題

（18分）2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍色或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

 

 

 

 

 

 

 

（1）圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—,限制酶II的識別序列和切點是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶I的一個切點，在目的基因的兩側(cè)各有一個酶II的切點。

①請畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA連接酶作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來＿＿＿＿，理由是：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也是最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿。

（3）從分子水平上，檢測綠色熒光蛋白基因是否插入到豬胎兒成纖維染色體的DNA上，檢測方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，檢測綠色熒光蛋白基因是否表達，檢測方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

（4）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為表達載體上的＿＿＿＿＿＿＿＿。獲得的轉(zhuǎn)基因豬，可以解決的醫(yī)學難題是可以避免＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

 

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