Question

某研究小組為測定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞（甲）和正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)．下列說法正確的有幾項(xiàng)（　　）
①在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí)，也可用胃蛋白酶處理；
②細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5% CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO₂的作用是刺激細(xì)胞呼吸；
③甲、乙細(xì)胞在持續(xù)的培養(yǎng)過程中，乙會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象；
④為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素；
⑤在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清、血漿等天然成分；
⑥僅用培養(yǎng)肝細(xì)胞的培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒．

• A、3
• B、4
• C、5
• D、6

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程

專題：

分析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．

解答： 解：①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2-8.4，而在這樣的環(huán)境中胃蛋白酶會(huì)變性失活，因此在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時(shí)，不可用胃蛋白酶處理，應(yīng)用胰蛋白酶處理，①錯(cuò)誤；
②細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH，②錯(cuò)誤；
③甲（腫瘤細(xì)胞）失去接觸抑制，而乙（正常肝細(xì)胞）具有接觸抑制，因此甲、乙細(xì)胞在持續(xù)的培養(yǎng)過程中，乙會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象，③正確；
④為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素，④正確；
⑤在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清、血漿等天然成分，⑤正確；
⑥病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，不能獨(dú)立生存，因此僅用培養(yǎng)肝細(xì)胞的培養(yǎng)液不能用來培養(yǎng)乙肝病毒，⑥錯(cuò)誤．
因此，③④⑤三項(xiàng)正確．
故選：A．

點(diǎn)評(píng)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件，掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記層次的考查．