Question

【題目】下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線。tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答：

(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用_____和_____ 限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含_____的培養(yǎng)基上進行。

(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列是_____。

A．啟動子 B．tetR C．復制原點 D．a(chǎn)mpR

(3)過程①可采用的操作方法是________。

A．農(nóng)桿菌轉化 B．大腸桿菌轉化 C．顯微注射 D．細胞融合

(4)過程②采用的生物技術是__________。

(5)為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用________技術。

A．核酸分子雜交 B．基因序列分析 C．抗原—抗體雜交 D．PCR

Answer 1

【答案】 HindⅢ BamHⅠ 氨芐青霉素 A C 胚胎移植技術 C

【解析】試題分析：結合題意分析，圖中質粒包括四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動子、復制原點，以及兩個限制酶切點，并且兩個限制酶切點的位置均在四環(huán)素抗性基因上；目的基因上有三個限制酶切點，與質粒對照，共有的是BamHI、HindIII。圖中①表示目的基因導入受體細胞，②表示通過胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)。

（1）由圖中信息可知，載體上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位點，目的基因上也有它們的酶切位點，應用此2種酶切。當人乳鐵蛋白基因和質粒連接成重組質粒后，tetR基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而ampR基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行。

（2）能讓目的基因開始表達的是啟動子，啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結合的DNA序列，是基因的一個組成部分，控制基因表達(轉錄)的起始時間和表達的程度，故應是A。

（3）將目的基因導入到動物中常用顯微注射法，故C正確；農(nóng)桿菌轉化法是將重組載體導入到植物中常用的方法，故A錯誤；大腸桿菌轉化法是導入到微生物細胞常用的方法，故B錯誤；細胞融合是細胞工程技術。

（4）過程②表示通過胚胎移植技術將早期胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)。

（5）檢測目的基因是否表達形成蛋白質，一般采用抗原-抗體雜交的方法，故C正確。