Question

香蕉果實(shí)中的淀粉酶可分為α-淀粉酶和β-淀粉酶兩種，其中β-淀粉酶不耐熱，在溫度70℃以上易鈍化，而α-淀粉酶耐熱。測(cè)定不同成熟度的香蕉中兩種淀粉酶的活性，對(duì)研究香蕉的保鮮具有重要意義。請(qǐng)完成以下的實(shí)驗(yàn)方案。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簻y(cè)定一定成熟度香蕉果實(shí)中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性

實(shí)驗(yàn)原理：α-淀粉酶和β-淀粉酶都能將淀粉分解為麥芽糖，通過(guò)特定方法測(cè)定麥芽糖的含量。以5分鐘內(nèi)每克樣品水解產(chǎn)生麥芽糖的毫克數(shù)表示酶活性的大小。

實(shí)驗(yàn)方法

⑴．酶液的制備：稱取香蕉果肉2克（含外殼），加適量水置研缽中研磨成勻漿。將勻漿轉(zhuǎn)入離心管中，攪拌均勻后離心，將上清液轉(zhuǎn)入100mL容量瓶，用水定容至刻度，得粗酶液。

⑵．首先將粗酶液分裝到兩支試管，甲試管酶液進(jìn)行70℃±0.5℃恒溫水浴中準(zhǔn)確加熱處理15分鐘后，乙試管酶液置于40℃水浴中。

⑶．取試管三個(gè)，編號(hào)，按下表加入各液：（在答案卷填寫(xiě)1、2號(hào)實(shí)驗(yàn)組所缺的內(nèi)容）

試劑 組別	1%可溶性淀粉液	酶液
對(duì)照組	0 mL	1 mL乙試管酶液
1號(hào)實(shí)驗(yàn)組（測(cè)α-淀粉酶活性）	2 mL	？
2號(hào)實(shí)驗(yàn)組 （測(cè)總淀粉酶活性）	2 mL	？

將以上各管試劑混勻后，置40℃水浴準(zhǔn)確保溫5分鐘，取出后立即向1、2、3號(hào)試管中加入4mL 0.4mol/L NaOH，以終止反應(yīng)。

⑷．測(cè)定各試管麥牙糖含量，計(jì)算總淀粉酶活性酶活性、α-淀粉酶活性和β-淀粉酶活性（如α-淀粉酶活性=實(shí)驗(yàn)組1測(cè)定值—對(duì)照組測(cè)定值。其他具體方法略）回答問(wèn)題：

a作為對(duì)照組，另一種做法是加入淀粉液但不加酶液，兩者相比較，現(xiàn)行做法的優(yōu)點(diǎn)是______________________________________。

b實(shí)驗(yàn)所測(cè)得β-淀粉酶活性=___________________________________。

Answer 1

⑶1 mL甲試管酶液（實(shí)驗(yàn)組1）  1 mL乙試管酶液（實(shí)驗(yàn)組2）

⑷a 香蕉酶提取液中可能含有還原糖，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)造成影響，現(xiàn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)?zāi)芟�除由此產(chǎn)生的誤差。

B．２號(hào)實(shí)驗(yàn)組測(cè)定值—1號(hào)實(shí)驗(yàn)組測(cè)定值（或=總淀粉酶活性—α-淀粉酶活性）

解析:

該題要測(cè)定一定成熟度香蕉果實(shí)中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性，因此應(yīng)遵循對(duì)照原則、科學(xué)性原則和單一變量原則。由題干得知β-淀粉酶不耐熱，在溫度70℃以上易鈍化，而α-淀粉酶耐熱。而實(shí)驗(yàn)原理題干中已經(jīng)有所描述，在具體步驟的設(shè)計(jì)中要注意：①編號(hào)；②注意等量原則；③甲試管酶液進(jìn)行70℃±0.5℃恒溫水浴處理后β-淀粉酶失活，用甲試管酶液分解淀粉所產(chǎn)生的麥芽糖的毫克數(shù)可衡量α-淀粉酶活性，乙試管酶液置于40℃水浴中后α-淀粉酶和β-淀粉酶的活性均未被破壞，用乙試管酶液分解淀粉所產(chǎn)生的麥芽糖的毫克數(shù)可衡量總淀粉酶的活性，故參照對(duì)照組，1號(hào)和2號(hào)的實(shí)驗(yàn)組應(yīng)分別加入1 mL甲試管酶液和1 mL乙試管酶液；a作為對(duì)照組，另一種做法是加入淀粉液但不加酶液，兩者相比較，加入酶液可排除香蕉酶提取液中可能含有的還原糖這個(gè)無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，避免誤差；預(yù)測(cè)得β-淀粉酶活性，因α-淀粉酶比β-淀粉酶耐熱，很難從粗酶液直接處理掉α-淀粉酶，故只能以２號(hào)實(shí)驗(yàn)組的測(cè)定值—1號(hào)實(shí)驗(yàn)組的測(cè)定值來(lái)衡量。