構(gòu)建重組質(zhì)粒DNA分子需要使用的工具酶包括

A．DNA聚合酶和DNA連接酶

B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶

C．逆轉(zhuǎn)錄酶和RNA聚合酶

D．DNA連接酶和DNA酶

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

42．(10分)

I．逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是一種表達(dá)型質(zhì)粒，結(jié)構(gòu)如圖15所示。圖上的“逆轉(zhuǎn)錄病毒序列”可以整合到動物細(xì)胞的染色體上，不斷地表達(dá)其攜帶的目的基因。(E、F、H分別為限制酶E、F、H的酶切位點)。

(1)逆轉(zhuǎn)錄的模板是＿＿＿＿，原料是＿＿＿＿＿。

 (2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，目的基因應(yīng)插入到該質(zhì)粒的位置是＿＿＿＿＿，此過程需使用的酶是＿＿＿。為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加＿＿＿＿＿的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。獲取大量重組質(zhì)粒后，將其再轉(zhuǎn)入到某種哺乳動物細(xì)胞中，可獲得大量重組逆轉(zhuǎn)錄病毒。

Ⅱ．圖16為培育轉(zhuǎn)基因小鼠基本過程的示意圖。請回答下列問題：

 (3)如A為重組質(zhì)粒溶液，將其導(dǎo)人原核期受精卵的方法是＿＿＿＿＿；如A為重組逆轉(zhuǎn)錄病毒，還可采�。撸撸撸叻椒�。

(4)小鼠出生后可從其尾巴提取＿＿＿＿分子，通過＿＿＿＿＿方法，可檢測出攜帶目的基因的小鼠。

(5)若目的基因進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠的方法是＿＿＿＿＿。

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科目：高中生物 來源：2012屆上海市浦東新區(qū)高三第三次模擬生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

(9分)回答下列有關(guān)生物工程的問題。
下表是基因工程中幾種限制酶識別序列及其切割位點；圖2是轉(zhuǎn)基因香蕉的培育過程，含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。

1．圖1是用限制酶_________________進(jìn)行切割得到的目的基因，可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后____。
2．從圖2中反映質(zhì)粒作為運載體的特點是___________________�；蚬こ讨羞�可以用___________________作為運載體。
3．圖2中構(gòu)建重組質(zhì)粒不能使用SmaI酶切割的原因是 ________________。
4．圖2中④表示組織培養(yǎng)過程中的________，它對植物激素調(diào)節(jié)的要求是______________。
5．圖2中的農(nóng)桿菌是基因工程中的________________。判斷該轉(zhuǎn)基因工程是否成功的依據(jù)是_________。

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科目：高中生物 來源：2011－－2012學(xué)年浙江北侖中學(xué)度第一學(xué)期八校聯(lián)考高三生物試卷 題型：綜合題

（每空1分，共9分）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖l、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

（1）一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割后有       個游離的磷酸基團，若用EcoR I切割圖2所示外源DNA，可得     個DNA片段。
（2）若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越       ，原因是                                    。
（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是          。
（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止                                 。
（5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入       酶。
（6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了                             。
（7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在                                的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測。

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科目：高中生物 來源：2013-2014學(xué)年北京市高三第一學(xué)期期中測試生物卷（解析版） 題型：綜合題

14分）、某質(zhì)粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如下圖所示，請回答下列問題。

(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi),使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來源屬于______                          。

(2)如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞,一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能復(fù)制，也不能______                    。

(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時,應(yīng)選用______       和_____        _兩種酶對______           和_____               _進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

(4)基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，下圖表示運用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。

培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有______       、_____             _。從檢測篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是______       菌落中的細(xì)菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的______           作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用一定濃度的鹽水澆灌煙草植株從        水平鑒定煙草植株的耐鹽性。

(5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用_______          技術(shù)，愈傷組織經(jīng)______               進(jìn)而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加                      。

 

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科目：高中生物 來源：2011-2012學(xué)年北京市海淀區(qū)高三上學(xué)期期中練習(xí)生物試卷 題型：綜合題

(10分）研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑一內(nèi)皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內(nèi)皮抑素的方法，請分析回答下列問題：

(1) 從肝細(xì)胞中分離總RNA，經(jīng)_________獲得cDNA，之后經(jīng)過_________擴增內(nèi)皮抑素基因。

(2) 擴增的目的基因與PUC18質(zhì)粒（如圖14所示）都用EcoR I和BamH I進(jìn)行雙酶切，然后用DNA連接酶進(jìn)行連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒。雙酶切避免了目的基因與載體________連接，還減少了________的連接，提高了重組質(zhì)粒的比例。

(3) 大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因，lacZ基因便可表達(dá)出β-半乳糖苷酶，當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被β-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之，則形成白色菌落。

選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入_______物質(zhì)。成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成______________顏色的菌落，原因是_____________________。之所以選擇大腸桿菌作為基因工程的受體菌，其突出的優(yōu)點是：___________________________________

(4) 從選擇培養(yǎng)基中挑取所需的單個菌落接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得粗提表達(dá)產(chǎn)物。將等量毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)板，370C培養(yǎng)。將等量不同濃度的粗提表達(dá)產(chǎn)物加進(jìn)培養(yǎng)孔中，72h后在顯微鏡下觀察細(xì)胞存活情況并，______________實驗結(jié)果如下表所示。

結(jié)果說明__________________________________________

 

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