Question

【題目】紅細(xì)胞生成素（EPO）是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限，目前臨床使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素（ rhEPO），其簡要生產(chǎn)流程如下圖。請回答：

（1）圖中①技術(shù)利用的是__________原理，利用該技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便__________。圖中②所指的物質(zhì)是__________。

（2）培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時(shí)，要在培養(yǎng)液中添加一定量的__________，以防培養(yǎng)過程的污染；還需定期更換培養(yǎng)液，目的是__________。

（3）檢測 rhEPO的體外活性需用抗 rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，可由 rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成。細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系除雜交瘤細(xì)胞外，可能還含有未融合的細(xì)胞和其他種類的融合細(xì)胞，體系中出現(xiàn)多種細(xì)胞類型的原因__________。是未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是__________。

Answer 1

【答案】DNA雙鏈復(fù)制 根據(jù)這一序列合成引物 rhEPO 抗生素 清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害 細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100% 不能無限增殖

【解析】

據(jù)圖分析可知：①是利用PCR技術(shù)短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)增目的基因，獲得此圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人工紅細(xì)胞生成素（rhEPO）期間要生產(chǎn)流程，最終產(chǎn)物是紅細(xì)胞生成素（rhEPO），由此可推測出圖中高效表達(dá)出②的重組CHO細(xì)胞是高效表達(dá)出紅細(xì)胞生成素（rhEPO）的重組細(xì)胞。

（1）由圖可知：①過程是PCR擴(kuò)增目的基因技術(shù)，PCR擴(kuò)增技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制，在PCR技術(shù)中，需要已知目的基因的核苷酸序列，根據(jù)這一序列合成引物。由圖可知最終產(chǎn)物是rhEPO，由此可推知，②是rhEPO。

（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，為防止培養(yǎng)過程的污染，培養(yǎng)液中需要添加一定量的抗生素，還應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。

（3）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系除雜交瘤細(xì)胞外，可能還含有未融合的細(xì)胞和其他種類的融合細(xì)胞，體系中出現(xiàn)多種細(xì)胞類型的原因細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%，未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活原因是B淋巴細(xì)胞不能無限增殖。