Question

【題目】紅細胞生成素（EPO）是體內(nèi)促進紅細胞生成的種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限，目前臨床使用的紅細胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細胞生成素（ rhEPO），其簡要生產(chǎn)流程如下圖。請回答：

（1）圖中①技術(shù)利用的是__________原理，利用該技術(shù)擴增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便__________。圖中②所指的物質(zhì)是__________。

（2）培養(yǎng)重組CHO細胞時，要在培養(yǎng)液中添加一定量的__________，以防培養(yǎng)過程的污染；還需定期更換培養(yǎng)液，目的是__________。

（3）檢測 rhEPO的體外活性需用抗 rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的雜交瘤細胞，可由 rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成。細胞融合實驗完成后，融合體系除雜交瘤細胞外，可能還含有未融合的細胞和其他種類的融合細胞，體系中出現(xiàn)多種細胞類型的原因__________。是未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是__________。

Answer 1

【答案】DNA雙鏈復制 根據(jù)這一序列合成引物 rhEPO 抗生素 清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害 細胞融合是隨機的，且融合率達不到100% 不能無限增殖

【解析】

據(jù)圖分析可知：①是利用PCR技術(shù)短時間內(nèi)擴增目的基因，獲得此圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人工紅細胞生成素（rhEPO）期間要生產(chǎn)流程，最終產(chǎn)物是紅細胞生成素（rhEPO），由此可推測出圖中高效表達出②的重組CHO細胞是高效表達出紅細胞生成素（rhEPO）的重組細胞。

（1）由圖可知：①過程是PCR擴增目的基因技術(shù)，PCR擴增技術(shù)的原理是DNA雙鏈復制，在PCR技術(shù)中，需要已知目的基因的核苷酸序列，根據(jù)這一序列合成引物。由圖可知最終產(chǎn)物是rhEPO，由此可推知，②是rhEPO。

（2）動物細胞培養(yǎng)時，為防止培養(yǎng)過程的污染，培養(yǎng)液中需要添加一定量的抗生素，還應定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。

（3）細胞融合實驗完成后，融合體系除雜交瘤細胞外，可能還含有未融合的細胞和其他種類的融合細胞，體系中出現(xiàn)多種細胞類型的原因細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%，未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活原因是B淋巴細胞不能無限增殖。