【題目】血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分,負(fù)責(zé)血液中O2或CO2的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問(wèn)題:

(1)將實(shí)驗(yàn)流程補(bǔ)充完整___________

(2)凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)_____________分離蛋白質(zhì)。

(3)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除________,洗滌干凈的標(biāo)志是____________________。

(4)分離血紅蛋白時(shí),由上到下第________層是血紅蛋白水溶液。

(5)下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)樣品的加入示意圖,正確的加樣順序是________。

(6)如果紅色區(qū)帶________________,說(shuō)明色譜柱制作成功。

【答案】血紅蛋白的釋放 凝膠色譜柱的裝填 相對(duì)分子質(zhì)量的大小 雜蛋白(或血漿蛋白) 離心后的上清液中沒(méi)有黃色 ④①②③ 均勻一致地移動(dòng)

【解析】

1、血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有:(1)樣品處理:①紅細(xì)胞的洗滌,②血紅蛋白的釋放,③分離血紅蛋白;(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液,②透析;(3)純化:調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì);(4)純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。

2、分析題圖:第一個(gè)表格是:表示血紅蛋白的釋放,第二個(gè)表格是:凝膠色譜柱的裝填。

1)樣品處理過(guò)程為:紅細(xì)胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析,所以第一個(gè)表格是:表示血紅蛋白的釋放,第二個(gè)表格是:凝膠色譜柱的裝填。

2)凝膠色譜法的原理是分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快;分子量小的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢。

3)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜質(zhì)蛋白,洗滌干凈的標(biāo)志是離心后的上清液中沒(méi)有黃色。

4)分離血紅蛋白溶液時(shí),將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中,經(jīng)過(guò)中速長(zhǎng)時(shí)離心后,可明顯看到試管中溶液分為4層,從上往下數(shù),第1層為甲苯層,第2層為脂溶性物質(zhì)的沉淀層,第3層為血紅蛋白水溶液,第4層為雜質(zhì)沉淀層。

5)正確的加樣順序可依據(jù)樣品在色譜柱及凝膠層中的滲入量進(jìn)行分析,可以得出是④①②③。

6)如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng),說(shuō)明凝膠色譜柱裝填得很成功,同時(shí)分離操作也正確的話,能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整,隨著洗脫液緩慢流出。

練習(xí)冊(cè)系列答案
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(4)請(qǐng)以AaBb為材料,選擇適當(dāng)?shù)挠N方法在最短的時(shí)間內(nèi)培育出長(zhǎng)果穗黃粒純種,用遺傳圖解及文字表示育種過(guò)程:________。

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1)細(xì)胞膜的基本支架是______(答圖中字母),B 與動(dòng)物細(xì)胞表面的________有密切關(guān)系。據(jù)圖可總結(jié)出細(xì)胞膜的功能有_____、__________

2)甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞中碘濃度大約為血漿中的 10-20 倍,圖中表示碘進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的跨膜運(yùn)輸方式是_____(填字母標(biāo)號(hào)),圖中可表示 CO2 的跨膜運(yùn)輸方式是______(填字母標(biāo)號(hào)),影響 CO2 跨膜運(yùn)輸速率的主要因素是_________

3N是植物細(xì)胞需要的大量元素,為探究植物細(xì)胞吸收NH4+是否需要能量,請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)步驟并回答問(wèn)題:

實(shí)驗(yàn)步驟:

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預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并分析:

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B、若甲細(xì)胞中__________________,則說(shuō)明植物細(xì)胞吸收 NH4+需要能量

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(1)將實(shí)驗(yàn)流程按先后順序補(bǔ)充完整:_______、_______。

(2)凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)_______分離蛋白質(zhì)。

(3)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除______,洗滌干凈的標(biāo)志是_____。為防止血液凝固,在采血容器中要預(yù)先加入____________。

(4)下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)樣品加入過(guò)程的示意圖,正確的加樣順序是_____

(5)在裝填色譜柱時(shí)不得有氣泡存在,因?yàn)?/span>_____________。在凝膠色譜操作過(guò)程中,不能發(fā)生_________的情況,一旦發(fā)生這種情況,需重新裝填凝膠色譜柱。如果紅色區(qū)帶______,說(shuō)明色譜柱制作成功。

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