Question

【題目】為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進(jìn)行了如圖1所示的實(shí)驗(yàn)。請據(jù)圖回答：

（1）步驟③的培養(yǎng)基成分與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是步驟③培養(yǎng)基中以_________為唯一碳源。從功能上講，步驟③中使用的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。

（2）步驟④中使用的培養(yǎng)基中常常要加入________作為凝固劑；接種時(shí)，若在培養(yǎng)基表面連續(xù)進(jìn)行4次劃線（如圖2），則需要對接種環(huán)灼燒________次。

（3）為了對石油分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，采用________法，得到了如圖3所示的平板。運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目________（填偏高或偏低）。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行________處理后才能倒掉。若想要長期保存優(yōu)質(zhì)菌種，可以采用________的方法。

Answer 1

【答案】石油 選擇 瓊脂 5 稀釋涂布分離 偏低 滅菌 甘油管藏

【解析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。篩選菌株的過程要使用選擇培養(yǎng)基，操作過程中要注意無菌操作，常用的固體培養(yǎng)基上接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法。微生物計(jì)數(shù)可用稀釋涂布平板法和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法。

（1）步驟③的培養(yǎng)基成分是篩選能分解石油的培養(yǎng)基，與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是步驟③培養(yǎng)基中以石油為唯一碳源。從功能上講，步驟③中使用的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，能分解石油的細(xì)菌能夠生長，其它菌不能生長。

（2）步驟③中使用的培養(yǎng)基中常常要加入瓊脂作為凝固劑。在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，因此按照圖中劃線順序進(jìn)行4次劃線，整個(gè)劃線過程中需要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒的次數(shù)為5次。

（3）為了對石油分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，采用稀釋涂布分離法，得到了如圖3所示的平板。由于稀釋難度大，常有菌落的重疊，運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目偏低。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，為避免二次污染，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉。甘油管冷凍保藏法是利用微生物在甘油中生長和代謝受到抑制的原理達(dá)到保藏目的，若想要長期保存優(yōu)質(zhì)菌種，可以采用甘油管藏的方法。