轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如下圖所示。圖中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等為限制酶，質(zhì)粒和抗病基因上的箭頭表示限制酶的切割位點(diǎn)。下圖表示四種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。

(1)若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割？________，說(shuō)明理由_________ 。

要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒？________。

(2)卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)。欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，重組質(zhì)粒中應(yīng)同時(shí)含有________基因，作為標(biāo)記基因。

(3)②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基？________；理由是______ 。

(4)④階段是否可使用不添加植物激素的培養(yǎng)基？________；理由是_______ 。

【解析】　(1)由圖示知抗病基因?yàn)槟康幕颍瑯?gòu)建表達(dá)載體時(shí)必須保持目的基因的完整性即不受破壞，而圖示的限制酶SmaⅠ則切割抗病基因的中段導(dǎo)致抗病基因被損壞，因此不能用此限制酶對(duì)抗病基因進(jìn)行切割。

(2)表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)必須的一個(gè)構(gòu)成是載體上應(yīng)該有標(biāo)記基因，以鑒定受體細(xì)胞是否導(dǎo)入了目的基因，由此可推出如果香蕉細(xì)胞導(dǎo)入了抗病基因，且導(dǎo)入的載體上含有抗卡那霉素，則此細(xì)胞置入含卡那霉素的培養(yǎng)基上才會(huì)正常生長(zhǎng)。

(3)②階段為愈傷組織，③階段為胚狀體或叢芽，當(dāng)兩個(gè)階段培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素高于細(xì)胞分裂素時(shí)，主要誘導(dǎo)組織脫分化和根原基的形成；當(dāng)兩個(gè)階段培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素高于生長(zhǎng)素時(shí)，則主要誘導(dǎo)組織再分化和芽原基的形成。

(4)④為試管苗，此時(shí)發(fā)育形成的幼嫩的芽、根尖等產(chǎn)生生長(zhǎng)素以促進(jìn)根的生長(zhǎng)。

【答案】　(1)不能　對(duì)SmaⅠ位點(diǎn)進(jìn)行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)　不能　(2)抗卡那霉素　(3)不能　2個(gè)階段培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值不同　(4)可以  因?yàn)檠磕墚a(chǎn)生生長(zhǎng)素促進(jìn)根的生長(zhǎng)

練習(xí)冊(cè)系列答案
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回答有關(guān)生物工程的問(wèn)題。

轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如下圖所示。圖中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等為限制酶，質(zhì)粒和抗病基因上的箭頭表示限制酶的切割位點(diǎn)。下表示四種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。

⑴若要獲得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割？_____，說(shuō)明理由______________________________________________________________。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒？________。
⑵卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)。欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，重組質(zhì)粒中應(yīng)同時(shí)含有___________基因，作為標(biāo)記基因。
⑶利用組織培養(yǎng)技術(shù)能將香蕉組織細(xì)胞培育成植株，這是因?yàn)橄憬督M織細(xì)胞具有__________，圖中①→②、②→③依次表示香蕉組織細(xì)胞的___________和_____________的過(guò)程。
⑷②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基？ _________；
理由是____________________________________________________________________。
④階段是否可使用不添加植物激素的培養(yǎng)基？_________；理由是_____________________。

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科目：高中生物 來(lái)源：2011屆寧夏銀川一中高三第一次模擬考試（理綜）生物部分 題型：綜合題

下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)。

下圖是轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程，含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒上的箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1) 用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaI酶切割，原因是__________________________________________。
(2) 構(gòu)建含目的基因的重組質(zhì)粒A時(shí)，選 用 BamhHI 和HindⅢ酶對(duì)_______和 _______進(jìn)行切割，可以防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化。
(3) ①?⑤中存在堿基互補(bǔ)配對(duì)的是____________。
(4) 香蕉組織細(xì)胞具有__________，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入目的(抗病)基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中④、⑤依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的_________、____________。培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加_________和__________以誘導(dǎo)外植體完成④、⑤生理過(guò)程，培養(yǎng)成完整的植物體。在形成愈傷組織的過(guò)程中，細(xì)胞的新陳代謝類(lèi)型是_____________。
(5) 如何檢測(cè)圖示過(guò)程最終是否取得成功？____________________________。

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科目：高中生物 來(lái)源：2010年福建省廈門(mén)市高二下學(xué)期質(zhì)量檢測(cè)生物試題 題型：綜合題

（10分）轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖所示。質(zhì)粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答：

（1）構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶            ，對(duì)         進(jìn)行切割。
（2）培養(yǎng)板中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)板篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有          ，作為標(biāo)記基因。
（3）香蕉組織細(xì)胞具有            ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的                   。

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科目：高中生物 來(lái)源：2009-2010學(xué)年廣東省廣州市七區(qū)高二下學(xué)期期末聯(lián)考生物試題 題型：綜合題

（9分）轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖所示。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答：                                                       

（1）香蕉組織細(xì)胞具有              ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的             、                 。
（2）構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用的限制酶                              ，
對(duì)                                       進(jìn)行切割。
（3）一個(gè)基因表達(dá)載體A的組成，除了抗病基因、啟動(dòng)子、終止子外，還必須含有                     ，以便將導(dǎo)入了抗病基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。
（4）有人認(rèn)為，轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品也是一把雙刃劍，甚至可能帶來(lái)災(zāi)難性的后果，請(qǐng)你列舉出一個(gè)可能出現(xiàn)的災(zāi)難性后果的實(shí)例：
____________________________________________________。

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科目：高中生物 來(lái)源：2014屆湖南省高二下學(xué)期第一次月考理科生物試卷（解析版） 題型：綜合題

轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖所示。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答：

（1）構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶      ，對(duì)             進(jìn)行切割。

（2）培養(yǎng)板中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有        ，作為標(biāo)記基因。

（3）香蕉組織細(xì)胞具有           ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過(guò)程中香蕉組織細(xì)胞的        。

 

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