Question

【題目】最新調(diào)查顯示手機(jī)每平方厘米就駐扎了12萬個(gè)細(xì)菌，這個(gè)數(shù)字足以令馬桶坐墊上的細(xì)菌隊(duì)伍汗顏。某生物興趣小組的同學(xué)，利用手機(jī)表面的細(xì)菌進(jìn)行了相關(guān)的培養(yǎng)研究。

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般含有的成分有________，另外還需滿足PH、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及對(duì)氧氣的需求。

（2）若想獲取不同菌的菌落形態(tài)，需要固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基配置的基本步驟有：計(jì)算→________。上述操作完成待培養(yǎng)基冷卻凝固后需將平板倒置，這樣做的目的是________。

（3）為研究手機(jī)表面微生物的種類，用稀釋涂布平板法進(jìn)行細(xì)菌的純化和分離。下面的四種菌落分布情況中，哪些選項(xiàng)是通過稀釋涂布平板法得到的________。

（4）研究小組用瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定玫瑰精油對(duì)手機(jī)表面細(xì)菌的抑制情況。該方法的操作步驟如下：首先制備牛肉膏蛋白胨平板，用涂布器將5種細(xì)菌分別接種到5個(gè)平板上，得到細(xì)菌平板。然后制備直徑為5mm 的濾紙圓片，采用________滅菌法處理，將滅菌的濾紙片分別放入________中浸泡10min，后將濾紙片放在5個(gè)細(xì)菌平板表面。最后將平板放入________中倒置培養(yǎng)48小時(shí)。通過測(cè)量________來檢測(cè)玫瑰精油對(duì)5種細(xì)菌的抑制效果。

Answer 1

【答案】水、碳源、氮源、無機(jī)鹽 稱量、溶化、滅菌、倒平板 避免水分蒸發(fā)過快，防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染 ABC 干熱 適宜濃度的玫瑰精油和無菌水 恒溫培養(yǎng)箱 透明圈的直徑（抑菌圈的直徑）

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)溶化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板、劃線接種、在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過適量稀釋后，均勻涂布在固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

2、常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽，在除上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

（2）制備固體培養(yǎng)基的基本步驟有：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。等平板冷卻凝固后，應(yīng)將平板倒置，這樣做的目的是，防止培養(yǎng)基冷卻過程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面對(duì)培養(yǎng)基造成污染。

（3）由圖和分析可知，A、B、C為通過稀釋涂布平板法得到的菌落，D為通過平板劃線法得到的菌落。

（4）為保持濾紙的干燥，滅菌時(shí)應(yīng)用干熱滅菌法，不宜采用高壓蒸汽滅菌法。將滅菌的濾紙片分別放入適宜濃度的玫瑰精油和無菌水中（對(duì)照）浸泡10min，再將濾紙片放在5個(gè)細(xì)菌平板表面，最后將平板放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)48h，防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠滴落造成污染。通過測(cè)量透明圈直徑(抑菌圈直徑)可判斷玫瑰精油對(duì)5種供試細(xì)菌的抑制效果，抑菌圈越大，說明抑制作用越強(qiáng)。