Question

20．某地的池塘中，含有一種有害的、難于降解的有機(jī)化合物A．研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）．實(shí)驗(yàn)的主要步驟如圖所示．請(qǐng)分析回答問(wèn)題：
（1）長(zhǎng)期保存“目的菌”采用甘油管藏的方法．
（2）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選“目的菌”，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少（減少、增加、不變）的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量增加．
（4）培養(yǎng)基平板平常應(yīng)倒過(guò)來(lái)放置． 在5個(gè)培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為10⁵ 的樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191．該過(guò)程采取的接種方法是稀釋涂布平板法；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較少一些．
（5）接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；
（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、菌種保存

	臨時(shí)保存法	甘油管藏法
適用對(duì)象	頻繁使用的菌種	長(zhǎng)期保存的菌種
培養(yǎng)及類型	固體斜面培養(yǎng)基	液體培養(yǎng)基
溫度	4℃	-20℃
方法	菌落長(zhǎng)成后于冰箱中保存，每3～6個(gè)月將菌種從舊的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上	將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的甘油混合均勻后于冷凍箱內(nèi)保存
缺點(diǎn)	菌種易被污染或產(chǎn)生變異	\\

解答 解：（1）長(zhǎng)期保存“目的菌”采用甘油管藏法．
（2）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選“目的菌”，因?yàn)橹挥心芊纸饣�合物A的微生物才能在該培養(yǎng)基上生存，因此這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）若培養(yǎng)液中含有目的菌，則培養(yǎng)若干天后，培養(yǎng)瓶中的化合物A含量應(yīng)該減少．因此培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量增加．
（4）培養(yǎng)基平板平常應(yīng)倒過(guò)來(lái)放置． 在5個(gè)培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為10⁵ 的樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191．由此可見，該過(guò)程采取的接種方法是稀釋涂布平板法；由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)只能在平板上觀察到一個(gè)菌落，因此與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較少一些．
（5）接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．
（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉．
故答案為：
（1）甘油管藏
（2）選擇       
（3）減少　   增加
（4）倒過(guò)來(lái)     稀釋涂布平板法　     少
（5）檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格       
（6）滅菌

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法；識(shí)記無(wú)菌技術(shù)和保藏菌種的兩種方法，掌握計(jì)數(shù)微生物的方法及相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．