Question

根據(jù)所提供材料，回答問題。

“煙草有害健康”，人人皆知。那么，能否通過實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步了解煙草對微生物基因突變的影響？已知：粘質(zhì)沙雷氏菌在正常情況下生長，是紅色菌落；當(dāng)外界因素引發(fā)粘質(zhì)沙雷氏菌發(fā)生突變時(shí)，菌落將呈現(xiàn)白色。某校學(xué)生小組設(shè)想：若用不同濃度的煙草浸出液處理粘質(zhì)沙雷氏菌，會發(fā)生什么？

供選材料及器具：粘質(zhì)沙雷氏菌液，煙草浸出液母液；NaCl，蛋白胨，瓊脂，4mol /L NaOH 溶液；培養(yǎng)皿，錐形瓶，量筒，1毫升移液管，燒杯，酒精燈，接種環(huán)，pH試紙等。

請補(bǔ)充、完善以下方案：

提出假設(shè)：

（1）假設(shè)                                                    。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

步驟一：制備培養(yǎng)基

（2）完成步驟一必須選用的材料是                        。（至少寫出2種）

步驟二：制備煙草浸出液的稀釋液

（3）煙草浸出液的稀釋液制備方法與要求                                           

                                                                               。

步驟三：接種、培養(yǎng)

（4）用不同濃度的煙草浸出液培養(yǎng)粘質(zhì)沙雷氏菌；用接種環(huán)蘸取菌液以           法接種在培養(yǎng)基上。接種時(shí)，需要將灼燒后的接種環(huán)冷卻后再取菌種，原因是                     。

（5）在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，為保證無雜菌污染，除培養(yǎng)基滅菌外，還需要將                   、

                          等滅菌。

步驟四：觀察并記錄數(shù)據(jù)：

分析討論

（6）將可能的實(shí)驗(yàn)結(jié)果在下面的方框中用直角坐標(biāo)圖直觀地表示出來（實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用相對值表示即可，標(biāo)明縱橫坐標(biāo)含義）：

Answer 1

（1）煙草浸出液濃度越大，菌落的紅色越少 / 白色菌落數(shù)越多   

（2）蛋白胨；  瓊脂    （或NaCl、等）       

（3）用移液管移取煙草浸出液母液進(jìn)行稀釋；

浸出液的稀釋液應(yīng)有一定濃度梯度，梯度一致；

有一定數(shù)量，至少3~5個(gè)等

（4）劃線（或點(diǎn)接）     冷卻可保證接種為活菌種

（5）接種環(huán)境滅菌    接種過程滅菌    稀釋液滅菌等

（寫出其中兩項(xiàng)即可）

（6）曲線圖（2分）（趨勢、橫縱坐標(biāo)標(biāo)識正確）

（曲線趨勢應(yīng)與假設(shè)對應(yīng)）