Question

14．以下是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個途徑模式簡圖．

（1）上圖中過程①的完成采用的方法有：用聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒，依據(jù)的生物學(xué)原理細(xì)胞膜具有流動性；
（2）過程④要用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶，過程⑥采用的方法叫鈣離子處理．
上圖中的質(zhì)粒本身含有氨芐青霉素抗性基因和M、N兩種限制酶（兩種酶切割序列完全不同）切割位點(diǎn)．若用限制酶M和N切割，通過凝膠電泳分離，分析得如下表．

分子量（kb）	1.0	2.0	3.0	4.0	5.0	6.0	7.0	8.0	9.0	10.0
酶M	+				+					+
酶N							+		+
酶M+酶N	+	+	+	+		+
凝膠電泳結(jié)果（1kb=1000對堿基，+表示檢測到該片段的存在

（3）該質(zhì)粒長度為16kb，在該質(zhì)粒中，M酶與N酶的切割點(diǎn)分別有3、2個．
（4）氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因（鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來）．
（5）在表達(dá)載體中，啟動子的作用是：RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動Ⅵ基因的轉(zhuǎn)錄．

Answer 1

分析 1、據(jù)圖分析，細(xì)胞A表示效應(yīng)B細(xì)胞，細(xì)胞Y表示雜交瘤細(xì)胞，結(jié)構(gòu)甲表示基因表達(dá)載體，①過程表示動物細(xì)胞融合，②過程表示雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，③過程表示提取信使RNA，④過程表示逆轉(zhuǎn)錄，⑤表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，⑥表示導(dǎo)入受體細(xì)胞．
2、分析表格和審清題意是解答本題的切入點(diǎn)．題干中提出，mtDNA是存在于人類細(xì)胞線粒體中雙鏈閉合環(huán)狀的DNA分子，因此限制酶在切割時，用酶M得到3個片段，則有3個切點(diǎn)，用酶N得到2個片段，則有2個切點(diǎn)．

解答 解：（1）上圖中過程①過程表示動物細(xì)胞融合，采用的方法有：用聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒，依據(jù)的生物學(xué)原理細(xì)胞膜具有流動性；
（2）過程④表示逆轉(zhuǎn)錄，需要逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶，過程⑥將目的基因?qū)�入微生物采用的方法叫鈣離子處理法．
（3）該mtDNA為環(huán)狀DNA，用酶M得到3個片段，則有3個切點(diǎn)，用酶N得到2個片段，則有2個切點(diǎn)．用酶N切割得到2個片段的長度分別為7和9，則該mtDNA的長度為16Kb．
（4）氨芐青霉素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因（鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來）．
（5）在表達(dá)載體中，啟動子的作用是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動Ⅵ基因的轉(zhuǎn)錄．
故答案為：
（1）①用聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒   ②細(xì)胞膜具有流動性
（2）③逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶  ④鈣離子處理
（3）⑤16   ⑥3  ⑦2
（4）⑧作為標(biāo)記基因（鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來）
（5）⑨RNA聚合酶   ⑩轉(zhuǎn)錄

點(diǎn)評 本題結(jié)合圖表，考查單克隆抗體的制備、基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟的細(xì)節(jié)，能結(jié)合圖中和表中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．