【題目】在日常生活中,人們非常重視食品安全問題。當(dāng)食品中的大腸桿菌數(shù)目超過某一限定值之后會(huì)對(duì)人體造成嚴(yán)重危害。因此,大腸桿菌被列為重要的微生物檢測指標(biāo)。以下是能夠檢測大腸桿菌數(shù)量的三種方法;卮鹣铝袉栴}:
(1)平板計(jì)數(shù)法:培養(yǎng)大腸桿菌通常使用_____(填“LB”或“MS”或“查氏”)培養(yǎng)基,其成分有酵母膏、蛋白胨、NaCl、H2O、X,其中為大腸桿菌提供氮源的是___________,X代表______。該方法所統(tǒng)計(jì)樣品中含菌數(shù)的結(jié)果往往偏低的原因是_________。
(2)濾膜法:將已知體積的水過濾后,將濾膜放在___培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)__色。
(3)多管發(fā)酵法:原理是根據(jù)大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特征,檢測水樣中大腸桿菌的方法。該方法使用的是乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,其乳糖可為大腸桿菌提供_______和_______。
【答案】LB 酵母膏、蛋白胨 瓊脂 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 伊紅美藍(lán) 黑 碳源 能量
【解析】
平板計(jì)數(shù)法是統(tǒng)計(jì)物品含菌數(shù)的有效方法,操作的順序是首先將樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋,使其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞,取定量的稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)使其逐漸生長成肉眼可觀察的菌落,然后通過稀釋度和樣本數(shù)量來計(jì)算菌數(shù)。但是,由于待測樣品往往不能完全分散成單個(gè)細(xì)胞,所以,長成的一個(gè)單菌落也可能來自樣品中的 2~3或更多個(gè)細(xì)胞,菌種培養(yǎng)因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低。
濾膜法是目前最為流行的檢測水中大腸桿菌群的方法。菌種培養(yǎng)濾膜法的具體步驟是首先將一定量的水體樣本注入 0.45μm的濾膜過濾,經(jīng)過抽濾,水中的細(xì)菌則被留在濾膜上,將濾膜貼于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng) 24h,溫度為恒溫 37℃,這使得菌群因發(fā)酵乳糖而使得濾膜呈現(xiàn)黑色。
多管發(fā)酵法是根據(jù)大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特征,檢測水樣中大腸桿菌的方法。多管發(fā)酵的大腸菌群陽性,如果在 44.5℃的培養(yǎng)基上進(jìn)行 24h的培養(yǎng),能釋放出熒光產(chǎn)物而使培養(yǎng)基在紫外光源的照射下呈現(xiàn)熒光反應(yīng),此種方法即可檢測出樣本中是否含有大腸桿菌。
(1)平板計(jì)數(shù)法培養(yǎng)大腸桿菌通常使用LB瓊脂固體培養(yǎng)基,其中酵母膏、蛋白胨可為大腸桿菌提供氮源,X代表瓊脂。由于待測樣品往往不能完全分散成單個(gè)細(xì)胞,所以,長成的一個(gè)單菌落也可能來自樣品中的 2~3或更多個(gè)細(xì)胞,菌種培養(yǎng)因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低。
(2)濾膜法首先將一定量的水體樣本注入 0.45μm的濾膜過濾,經(jīng)過抽濾,水中的細(xì)菌則被留在濾膜上,將濾膜貼于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng) 24h,溫度為恒溫 37℃,這使得菌群因發(fā)酵乳糖而使得濾膜呈現(xiàn)黑色。
(3)多管發(fā)酵法是根據(jù)大腸桿菌能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特征,檢測水樣中大腸桿菌的方法。該方法使用的是乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,其乳糖可為大腸桿菌提供碳源和能量。
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